缺氧大鼠神经元中IRAK-4表达的实验研究

来源 :中华医学会神经外科学分会第九次学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:corbet2003
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  目的 观察缺氧后大鼠神经元细胞株B35中白细胞介素-1受体相关激酶-4(Intedeukin-1 Receptor-Associated Kinases,IRAK-4)表达的变化,探讨神经元炎症反应及凋亡的相关机制.方法 将培养的B35细胞置于低氧(3%O2,5%CO2,92%N2)条件下培养1、3、6、12、24、48h,用RT-PCR及Western blot检测IRAK-4的mRNA及蛋白表达的变化,激光共聚焦技术观察IRAK-4在细胞内表达变化情况,酶联免疫吸附法检测培养液上清白细胞介素6(IL-6)的含量,流式细胞技术检测细胞凋亡率.结果B35细胞IRAK-4的mRNA和蛋白表达随缺氧时间延长而变化,1h开始增加,3h增加明显(p<0.05),6h达到高峰(p<0.05),12h仍维持在较高水平(p<0.05),24h下降与常氧无显著差异(p<0.05),48h以后降低至常氧水平以下(p<0.05).免疫荧光结果也显示随着缺氧时间的延长,荧光强度逐渐增强.培养上清液IL-6的含量的变化也符合相似的变化趋势.细胞凋亡在缺氧6h显著升高,在缺氧12h达到高峰,并维持在较高水平.结论 缺氧可以影响大鼠神经元内IRAK-4的mRNA和蛋白表达,提示神经元内存在对免疫反应起调节作用的TLR/IL-1R家族信号传导系统,并且调控下游炎症反应,与细胞凋亡相关.
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