【摘 要】
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变性高效液相色谱(Denaturing High Performance Liquid Chromatography,DHPLC)是近年发展起来的一种高通量筛选核酸多态性和基因突变的新技术,已广泛应用于生命科学研究的众多领域.本文对该技术的基本原理及在植物病原线虫检疫中的应用前景进行了评述.与传统的分子生物学方法相比较，DHPLC具有许多优势：高通量检测，适合大量样本的同时检测,自动化程度高，提高
【机 构】
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深圳出入境检验检疫局,广东深圳518001;深圳市检验检疫科学研究院,广东深圳518045 湖南出
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变性高效液相色谱(Denaturing High Performance Liquid Chromatography,DHPLC)是近年发展起来的一种高通量筛选核酸多态性和基因突变的新技术,已广泛应用于生命科学研究的众多领域.本文对该技术的基本原理及在植物病原线虫检疫中的应用前景进行了评述.与传统的分子生物学方法相比较，DHPLC具有许多优势：高通量检测，适合大量样本的同时检测,自动化程度高，提高检测效率，降低劳动强度，检测的准确率高，特异性强，研究成果易于形成标准推广使用，检测结果以波形图呈现，直观明了，这些优势都极大地满足了现代植物线虫检测工作的需要，除此之外，DHPLC与现有的植物线虫检测技术和方法有很好的兼容性。
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根结线虫(Meloidogyne spp.)是世界性分布的威胁全球农业生产的重要病原物,每年给农业生产造成巨大的经济损失.象耳豆根结线虫(M.enterolobii)在南方地区分布广泛,目前已经成为我国热带、亚热带地区的一个重要潜在病原物.本研究首次以象耳豆根结线虫ITS为靶标基因,建立了一种LAMP快速分子检测技术.结果表明,本研究建立的检测技术能够从1 1种植物寄生线虫中特异检测出象耳豆根结线
本文从实验室能力验证的概念,怎样申报能力验证计划,怎样实施能力验证计划项目,植物线虫鉴定实验室能力验证的意义4个方面对植物线虫鉴定实验室能力验证作了介绍,有助于更多的实验室参加植物线虫鉴定实验室能力验证活动.
用同工酶技术对海南岛7种主要南药植物31个样品进行分类鉴定,发现为害海南岛南药植物的根结线虫有5个种,分别是南方根结线虫(Meloidogyne incognita)、爪哇根结线虫(M.javanica)、花生根结线虫(M.arenaria)、西班牙根结线虫(M.hispanica)和象耳豆根结线虫(M.enterolobii).用引物18S和28S扩增31个根结线虫种群的rDNA-ITS区序列,
本文研究了在砂土、黏性土、壤土情况下的土壤线虫情况.在沙土、黏性土、壤土中,根结线虫分别占分离出线虫总数的35.4％、29.1％、32.6％,绕线属线虫为16.2％、21.5％、26.3％;黏性土中小杆属线虫为11.7％,螺旋属线虫为10.9％.它们是该土壤线虫的优势属,稀有属是滑刃属、扭钩属、中矛线属、矛线属占、长尾属.还对土壤线虫的营养类型进行了调查与分析.
2007～2010年,在甘肃省不同地区的小麦、大麦和燕麦种植区,小麦(燕麦)抽穗至扬花期间,采集褪绿发黄、植株矮小的小麦根系及根围5～15cm深的耕作层土壤,或采集当年种植小麦、大麦和燕麦的田间土壤,用塑料袋装好保湿,运回室内冷藏备用.详细记录采集地的小麦品种、前茬作物、土壤质地以及灌溉情况等.用简易漂浮法收集孢囊,计数.共调查了甘肃省10个地市的29个麦类种植区县，采集到233份根际土壤和根系。
通过蔬菜根结线虫检测能力验证计划的实施,对包括澳门特别行政区在内的全国23个省、自治区、直辖市51个参试实验室的检测结果进行了系统评价和分析,旨在了解国内蔬菜根结线虫鉴定领域的整体水平,识别和掌握实验室间存在的差异,加强重点领域实验室能力建设,督促其保持和提高植物线虫检测能力.
2006年10月至2008年9月,笔者对深圳观赏植物线虫进行了采样调查,依据形态特征从所采集的观赏植物根际介质样品中分离鉴定出燕麦真滑刃线虫(Aphelenchus avenae Bastian,1865)、伞菌滑刃线虫(Aphelenchoides agarici Seth&Sharanma,1986)、锡博尔滑刃线虫(Aphelenchoides cibolensis Riffle,1970)
2008-2009年，作者对云南部分烟草产区和部分蔬菜产区的根结线虫病进行了调查、采样和病原线虫的种类鉴定，从而明确了受害地区根结线虫的种类及分布，为防治根结线虫病提供了理论依据。对采自云南省部分作物上的53个根结线虫病样本,运用形态学、同工酶和分子生物学方法进行鉴定,共鉴定出3种根结线虫:南方根结线虫(Meloidogyne incognita)、爪哇根结线虫(M.javanica)和花生根结线
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