Lin28B在骨肉瘤干细胞中的调控作用及机制研究

来源 :中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kenkenson
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  目的:慢性炎症能够激活肿瘤干细胞并引起肿瘤耐药和转移.但是慢性炎症调控肿瘤干细胞的分子机制并不是十分清楚.Lin28是RNA结合蛋白,研究发现在人类15%的肿瘤组织中Lin28都高表达.Lin28能够促进肿瘤的起始,发展和转移.Lin28通过调节let-7/8的表达调控骨肉瘤肿瘤干细胞的功能.方法:我们利用免疫组织化学染色和免疫荧光染色的方法对骨肉瘤组织中的Lin28B和肿瘤干细胞标志ALDH1进行检测,分析其表达与骨肉瘤临床分期的相关性,明确Lin28B在骨肉瘤发生发展中的作用.接着利用体外实验探讨Lin28B与骨肉瘤干细胞的干性特征之间的关系.我们利用siRNA干扰技术和IKKβ激酶的小分子抑制剂IMD-0354作用于MDA-MB-231细胞,研究炎性分子IKKβ对肿瘤干细胞的影响.利用Western blot技术和共聚焦显微镜检测Lin28B对Wnt信号通路关键蛋白及其下游基因的影响,利用RNA免疫共沉淀技术检测Lin28B与TCF4的mRNA之间的相互作用,利用免疫组织化学技术研究骨肉瘤临床样本中Lin28B和TCF4的相关性.最后,我们利用NOD/SCID小鼠移植瘤模型,研究IMD-0354联合化疗药紫杉醇对MDA-MB-231肿瘤生长和转移的影响.
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