氧化葡萄糖酸杆菌SCB329基因组的大小与结构的研究

来源 :'2000北京医药生物技术及其临床应用研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:windyson
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作为"人类基因组计划"的一部分,微生物基因组的研究突飞猛进,许多重要的微生物的测序工作已完成或接近完成.微生物基因组的研究目前主要集中在致病微生物和重要的模式生物上,随着研究的深入开展,更多的微生物的基因组的研究将提上历史日程来.国内微生物基因组研究开展相对较晚,但着眼于微生物的巨大应用前景,已有若干微生物的测序工作在进行.维生素C是人体必需的一种维生素,具有广泛的生理作用,在医药工业、食品工业和农业上有重要用途."两步发酵法"是我国独创的生产维生素C的新工艺,迄今为止在世界上仍然处于领先地位.它的特点在第二步发酵即从L-山梨糖到维生素前体-2-酮基-L-古龙酸的转化是由两株细菌混合发酵完成的.氧化葡萄糖酸杆菌SCB329(包括As.1.945,)是"两步发酵法"生产维生素C前体-2-酮基-L-古龙酸的主要产酸菌.将SCB329作为葡萄糖酸杆菌属的模式菌株和重要的工业微生物来开展基因组的研究,具有积极的现实意义和潜在应用价值.收集氧化葡萄糖酸杆菌SCB329的纯培养对数期的菌体,采用凝胶包埋法制备完整染色体,用稀有酶切位点的限制性内切酶和脉冲场电泳技术对SCB329的基因组进行了分析,SepⅠ(5-ACT AGT)酶切有24个片段,大小从10Kb到320Kb,XbaⅠ(5-TCT AGA)酶切产生40个片段,大小从4Kb到200Kb,综合两种限制酶酶切片段长度的总和结果,SCB329基因组大小为2700Kb.SCB329基因组由一条2500Kb的染色体和一个245Kb的质粒组成.通过用DNaseⅠ和S1核酸酶处理胶块后跑电泳证实SCB329的染色体和质粒的拓扑学结构均为环状的.本工作为构建SCB329的基因文库规模提供了理论依据.将为深入开展基因组的研究打下良好的基础,并为从分子生物学角度改进维生素C生产工艺提供新的思路.
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