【摘 要】
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目的:观察颈动脉不同狭窄程度外周血内皮祖细胞(Endothelial progenitor cell,EPC)数量、功能和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)表达,探讨eNOS在颈动脉狭窄中的可能调节机制.方法:①全脑血管造影确定的颈动脉狭窄病人30例(轻度狭窄10例,中度狭窄10例,重度狭窄10例)作为颈动脉狭窄组,另选全脑血管造影正
【机 构】
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武汉大学人民医院神经内科 十堰太和医院神经内科
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目的:观察颈动脉不同狭窄程度外周血内皮祖细胞(Endothelial progenitor cell,EPC)数量、功能和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)表达,探讨eNOS在颈动脉狭窄中的可能调节机制.
方法:①全脑血管造影确定的颈动脉狭窄病人30例(轻度狭窄10例,中度狭窄10例,重度狭窄10例)作为颈动脉狭窄组,另选全脑血管造影正常的10例作为对照组.②在全脑血管造影术中抽取患者股动脉血,采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的12孔培养板,于体外培养4天后,洗去非贴壁细胞,换液培养至7天.③收集贴壁细胞,通过细胞形状来初步鉴定EPC;应用激光共聚焦鉴定细胞吞噬乙酰化低密度脂蛋白(Acetylated low density lipoprotein,ac-LDL)及结合荆豆凝集素(Ulex europaeus agglutinin-Ⅰ,UEA-Ⅰ)的能力。
结果:EPC培养及鉴定。密度梯度离心法分离得到的人外周血单个核细胞，刚接种时细胞均呈圆形；培养3天洗去未贴壁细胞，可以见到典型的细胞集落以及圆形或不规则形状的贴壁细胞。
结论:①外周血中EPC数量、增殖和迁移能力以及eNOS表达在CS组显著低于正常对照组，提示CS存在EPC损伤，进而影响内皮损伤修复，eNOS可能参与了EPC损伤介导的CS发生、发展；②不同程度狭窄中EPCeNOS表达差异显著，表明eNOS在维持动脉内皮完整性中所起的重要作用，为后期基因修饰EPC在颈动脉狭窄中的治疗提供理论支撑。
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