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用单克隆抗体7DI包被ELISA板，用大片吸虫分泌排泄抗原免疫家兔，按常规方法制备兔多克隆抗体作为第二抗体，建立了检测大片吸虫ES抗原的双抗体夹心EL ISA方法。结果表明，该双抗体夹心ELISA的最佳反应条件为：单克隆抗体7D1包被浓度为12．282．g／mL，兔抗牛多克隆抗体最佳稀释倍数为1：10 000，酶标抗体工作浓度为1：8 000，最佳封闭液为10％的脱脂奶粉，血清作用时间为lh，多克隆抗体作用时间为lh，酶标二抗作用时间为45rain，底物显色时间为20rain，酶标抗体以D450nm≥0.130作为阴阳临界值。用该ELISA方法分别检测胰阔盘吸虫ES抗原、前后盘吸虫ES抗原、伊氏锥虫VSG抗原、弓形虫IHA抗原、旋毛虫和泰勒虫抗原。结果表明，该ELISA方法与以上病原均无交叉反应，具有良好的特异性。敏感性实验结果表明，该方法的最低检测下限为55．93ng／mL。同时检测247份临床样品，抗原检出率为23．89％，该方法的建立为大片吸虫的检测及流行病学调查提供了有效工具。