苹果是我国第一大水果,也是我国目前优势农产品之一。种植分布范围广,栽培面积和产量均居世界首位。苹果炭疽病是由苹果炭疽病菌(Glomerella cingulata)侵染而造成的一种苹果病害,是苹果三大病害之一,具有潜伏侵染特性,不仅在田间危害树体和果实,还可引起苹果采后腐烂,成为贮藏期的重要病害,严重制约了苹果产业的发展。目前控制苹果炭疽病害,仍以化学杀菌剂为主,长期盲目使用化学杀菌剂,已经带来一系列严重问题：残留、污染、抗药性、伤及非靶标生物以至于破坏生态平衡等。于是,寻求安全、无毒、有效控制苹果果实病害新的健康管理模式成为当务之急,利用拮抗微生物防治苹果果实病害是有望成为代替化学杀菌剂的一种安全、无毒、有效的新方法。近年来,利用拮抗微生物防治苹果枝干腐烂病、苹果轮纹病已取得较好的效果,针对苹果炭疽病的危害,本实验选取山东省多个果园(沂源、蒙阴、曲阜、齐山、阜山、肥城)的苹果园土壤样品中分离拮抗菌,挑取385 株细菌,通过平板对峙培养法,成功筛选出26 株对苹果炭疽病菌具有拮抗作用的细菌。通过使用通用引物ITS4、ITS5 扩增出rDNA-ITS 对筛选到的真菌进行测序并结合形态特征,生理生化特征分析,筛选出几种生防菌。鉴定结果表明,26 个菌种分别为Bacillus amyloliquefaciens、Bacillussubtilis、Burkholderia ambifaria、Lysobacter capsici、Pseudomonas entomophila、Pseudomonaskoreensis、Pseudomonas putida 等。进一步的功能验证及发酵实验进行中。本实验为更进一步筛选优质苹果炭疽病生防菌提供了丰富的菌源。