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目的:研究广州地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌CTX-M型超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的分子表型、流行病学和耐药基因环境特征。方法:收集2007-2008年广州地区9所医院临床分离产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,K-B纸片法了解其对抗菌药物敏感性;PCR检测ESBLs分子表型;接合试验、质粒图谱、PCR分析CTX-M-15型EsBLs的基因环境;ERIC-PCR分析产CTX-M-15型ESBLs菌株的分子同源性。结果:收集的181株大肠埃希菌和180株肺炎克雷伯菌产ES-BLs株对亚胺培南及头孢哌酮一舒巴坦耐药率都低于12%,而对头孢他啶有较高耐药率,分别为48.3%和61.3%。67.3%(243/361)的产ESBLs株为CTX-M表型,其中CTX-M-1群和CTX-M一9群各占46.9%和53.1%,未发现其他CTX-M亚群。CTX-M-14和CTX-M-15是最常见的ESBLs分子表型,其中CTX-M-14在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBL株的检出率分别为35.4%(64/181)和28.3%(51/180),CTX-M-15在大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBL株的检出率分别为21.5%(39/181)和26.1%(47/180),此外还检出对头孢他啶有水解活性的CTX-M-55,CTX-M-19,CTX-M-27。肠杆菌科基因间重复序列引物PCR(ERIC-PCR)分析CTX-M-15产生株同源性,39株大肠埃希菌被分为28个基因型,47株肺炎克雷伯菌被分为30个基因型。基因环境显示,67.6%(25/37)和32.4%(12/37)blaCTX-M-15分别位于65 kb和90 kb的可接合质粒上,65kb质粒除blaCTX-M-15阳性外,未检到blaTEM-1、qnrB、blaDHA-1、blaOXA-1,aac(6’)-Ib-cr等耐药基因。1株接合菌90 kb质粒还存在blaOXA-1和blaTEM-1耐药基因,其余7个90 kb质粒耐药基因表型同65 kb质粒。所有blaCTX-M-15都位于ISEcpl-like插入序列下游,ISEcp1-like末端与blaCTX-M-15间距均为48 bp。结论:广州地区ESBLs主要分子表型为CTX-M型,主要流行为CTX-M-14型。以CTX-M-15为代表能水解头孢他啶的CTX-M型ESBLs在本地区检出增多值得关注,携blaCTX-M-15的质粒的传播,可能是本地区CTX-M型ESBLs高发生率的主要原因。