【摘 要】
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目的：研究有氧运动对C57BL/6小鼠骨骼肌脂代谢相关基因表达的影响,探索有氧运动改善脂代谢的相关机制.方法：雄性C57BL/6小鼠40只,体重为14.82±0.41克.随机分为对照组(20只)和运动组(20只),分笼饲养,每笼5只,自由饮水,光照每天12小时.适应性训练一周,之后连续进行1次/天,60分钟/次,5次/周,为期6周的跑台训练,速度为12米/分钟,强度约为75％VO2 max.动物训
【机 构】
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天津体育学院健康与运动科学系,天津300381 河南省黄淮学院,河南省驻马店436800
【出 处】
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2010年中国运动生理生化学术会议
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目的：研究有氧运动对C57BL/6小鼠骨骼肌脂代谢相关基因表达的影响,探索有氧运动改善脂代谢的相关机制.方法：雄性C57BL/6小鼠40只,体重为14.82±0.41克.随机分为对照组(20只)和运动组(20只),分笼饲养,每笼5只,自由饮水,光照每天12小时.适应性训练一周,之后连续进行1次/天,60分钟/次,5次/周,为期6周的跑台训练,速度为12米/分钟,强度约为75％VO2 max.动物训练结束后24小时,各组小鼠禁食16小时.经腹膜下注射水合氯醛麻醉动物后取内眦静脉血1-1.5 ml,4℃静置30分钟后,3000 rpm离心10分钟,提取血清,置于-20℃保存,以备血脂生化指标检测.同时立即分离出小鼠股四头肌,迅速置于液氮中速冻,后保存于-80℃冰箱,以备提取总RNA.酶法测定各组小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)及游离脂肪酸(FFA)水平.用Trizol法提取小鼠股四头肌总RNA,采用晶芯cDNA扩增标记试剂盒对样品RNA进行荧光标记.将标记后的cDNA溶于80 μl杂交液中,42℃与芯片杂交过夜.杂交结束后,对芯片进行扫描.采用LuxScan 3.0图像分析软件(Capital-Bio)对芯片图像进行分析.利用Cluster 3.0 (Stanford tool)对具有表达信号的基因进行聚类分析,采用SAM软件进行差异表达基因的分析,统计方法选用独立样本t检验(Two Class Unpairedt Test),差异倍数定为1.5倍(基因表达上调则大于1.50,基因表达下调则小于0.67),p值小于0.05.结果：6周有氧运动后,小鼠体重无显著性变化,血清HDL水平增加40.7％ (p＜0.05),TC下降13.7％ (p＜0.05),FFA、TG分别下降19.1％、11.5％,但是无显著性差异.聚类分析结果显示,NC组和NE组分别各自聚集.总RNA甲醛变性凝胶电泳结果表明28S、18S条带清晰,其中28S与18S的比值接近2：1,提示RNA无降解.基因芯片结果显示,脂代谢相关基因有15个发生差异表达,上调的基因11个,包括Ga13st1、Lp1、Acs14、Adfp、P1cb1、Lbp、Acsbg2、Ehhadh、Apoc3、Fabp5和Apoe,分别上调1,61、1.62、1.71、1.74、1.80、1.95、2.08、2.09、2.28、2.96和3.03倍(p＜0.05)；下调的基因为V1d1r、Lpin1、Osbp和Hadhb,分别下调0.62、0.24 0.61和0.62倍(p＜0.05).结论：有氧运动可以增加小鼠血清HDL的含量,降低TC的含量,且可以使骨骼肌脂代谢相关基因发生差异表达.本实验为运动健身及改善脂代谢相关疾病提供理论依据.
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