【摘 要】
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目的：探讨全反式维A酸(atRA)对小鼠胚胎腭间充质细胞(MEPM)成骨分化的影响及其机制. 方法：分离培养MEPM细胞,在成骨诱导(OM)培养基中分别加入atRA 0.1和1.0 μmol· L-1,分
【机 构】
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广东医学院附属南山医院口腔科,广东深圳518052
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目的：探讨全反式维A酸(atRA)对小鼠胚胎腭间充质细胞(MEPM)成骨分化的影响及其机制.
方法：分离培养MEPM细胞,在成骨诱导(OM)培养基中分别加入atRA 0.1和1.0 μmol· L-1,分别于培养1,3,5,7和9d用MTT法测定细胞存活率,化学比色法检测碱性磷酸酶(ALP)活性.培养21 d后,Von-Kossa染色观察矿化面积比.培养9d后,逆转录PCR(RT-PCR)检测成骨相关基因Runx2、骨桥蛋白以及骨形态发生蛋白受体(Bmpr) 1b,Bmpr2和Smad5 mRNA的表达水平.
结果：培养9d后,与正常对照组相比,OM及OM+atRA 0.1和1.0 μmol· L-1组细胞存活率明显降低(P＜0.05);OM组细胞ALP活性最高,OM+atRA 1.0 μmol· L-1组ALP活性明显低于OM组(P＜0.05).培养21 d后,Von-Kossa染色结果显示,OM+atRA 1 μmol· L-1组矿化结节面积比为(3.56±1.24)％,明显低于OM组(10.33±2.29)％(P＜0.05).培养9d后,OM组的Runx2相对表达各组内最高,OM+atRA 1.0 μmol·L-1组与其相比约下调20％(P＜0.05).与正常对照组相比,OM组、OM+atRA 0.1和1.0 μmol· L-1组骨桥蛋白mRNA表达明显升高(P＜0.05).OM组的Bmpr1b mRNA表达水平为正常对照组的1.6倍,OM+atRA 1.0 μmol· L-1组的相对表达仅为OM组的33℃(P＜0.05).OM+atRA 1.0 μmol· L-1组Smad5 mRNA的表达水平明显低于OM组(P＜0.05).
结论：atRA能抑制MEPM的成骨分化,其作用机制可能与其下调Bmpr1b影响BMPR信号有关.
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