结核分枝杆菌CFP10、MTB 38和MTB 48抗原基因克隆及在大肠杆菌中的表达纯化

来源 :第八次全国生物制品学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户：guozl

【摘要】

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【作者】

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叶凡徐帆洪

【机构】

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上海生物制品研究所,上海,200051

【出处】

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第八次全国生物制品学术会议

【发表日期】

：

2005年4期

【关键词】

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结核分枝杆菌血清学诊断原核表达载体重组蛋白

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目的:分别构建结核分枝杆菌CFP10、MTB38和MTB48基因的原核表达载体并进行重组蛋白的表达,重组蛋白应用于结核病人的血清学诊断. 方法:用PCR技术分别扩增结核分枝杆菌CFP10、MTB38和MTB48基因,并克隆入pQE30和pQE31质粒,构建成pQE30-CFP10、pQE31-MTB38、pQE30-MTB48重组子. 结果:得到的重组体分别转化大肠杆菌M15后,经IPTG诱导,表达的CFP10和48kD表达的蛋白是以可溶性形式存在于胞质中,而38kD却是以包涵体方式存在.分别经Ni-NTA亲和吸附纯化后,获得较高纯度的CFP10、MTB38k和MTB48蛋白产物并进行了初步的血清学检定,为快速、灵敏的血清学诊断试剂的研发奠定了基础.

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