以MDA-7基因为标靶的基因疗法在食管癌治疗中与化疗产生协同作用

来源 :第八届中国肿瘤学术大会暨第十三届海峡两岸肿瘤学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chinagirlxin
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目的:检验过表达人黑色素瘤分化相关基因7(mda-7)/白介素(IL)-24基因在食管癌细胞中的抗肿瘤作用,及其与化疗药物联合应用的协同作用. 方法:为了检测食管癌细胞上IL-24受体的表达情况,我们使用RT-PCR法检测了人食管癌细胞株TE-11和YES-5中IL-20R1、IL-20R2和IL-22R1的表达水平.使用表达mda-7/IL-24基因的重组人复制缺陷腺病毒Ad-mda-7感染了TE-11和YES-5细胞,并用MTT法检测细胞抑制率,Ad-LacZ被用作对照腺病毒,人成纤维细胞株OUMS-24被用作正常对照细胞。为了证明在Ad-mda-7感染后,细胞内产生了MDA-蛋白,我们用Western blot法检测了感染前后细胞中的MDA-水平。在临床化疗中常用化疗药物5-氟尿嚓陡C5-FUN、顺铂,效裂霉素(MMC)和足叶乙试(VP-16)分别与Ad-mda-7联合应用作用于食管癌细胞株,并用MTT法对比单独应用的细胞抑制作用,从而检验其抗肿瘤的协同作用。借助流式细胞法,检测了Ad-mda-7与化疗药单独或联合应用时,细胞周期的变化。最后用Western blot法检测了Ad-mda-7与化疗药联合作用时,与细胞凋亡和细胞增殖相关分了的变化情况。 结果:TE-11和YES-5均表达三种工L-24受体。在被Ad-mda-7感染后,食管癌细胞被剂量依赖性地抑制生长,但Ad-LacZ在同剂量时对细胞无抑制作用。成纤维细胞OUMS-24被Ad-mda-7感染后没有发生明显细胞抑制。在Ad-mda-7感染后,TE-11和YES-5细胞中均可检测到MDA一蛋白表达。在Ad-mda-7与5-FU、CDDP、MMC和VP-16分别联合应用后,与单独应用相比产生了更强的抗肿瘤协同效应。细胞周期研究显示Ad-mda-7与5-FU联合应用诱导细胞更多停滞在Gz/M和S期,Go/G、期细胞减少,同时subGl期细胞增加。Western blot结果显示与单用5-FU相比,联合应用时Ad-mda-7诱导了更多的细胞凋亡,增加了Akt磷酸化,但降低了工kB-a的表达水平。 结论:Ad-mda-7与化疗药联合应用与食管癌细胞,产生了更强的抗肿瘤协同效应,为临床化疗治疗食管癌提供新选择。
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