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为建立PEG介导的枸杞内生真菌NQG8Ⅱ4 (Fusarium nematophilum)的遗传转化体系。以NQG8Ⅱ4的幼嫩菌丝为材料,通过PEG介导的原生质体转化法,将含有潮霉素标记的质粒PDL2转入NQG8Ⅱ4的原生质体中;对获得的转化子进行PCR检测。试验获得NQG8Ⅱ4的最优原生质体制备条件为:菌龄16 h的菌丝0.05 g于含有3%崩溃酶+1%溶壁酶的混合酶液中反应2.5 h;整个试验的渗透压稳定剂为0.7 mol/L NaCl,原生质体获得量达到最大为6.70×10~7个/mL。试验共获得57个转化子,转化效率为2.85个/μg。对转化子进行PCR检测,表明外源的hph基因已经整合到NQG8Ⅱ4的基因组中。本试验成功建立了稳定的PEG介导的NQG8Ⅱ4菌株遗传转化体系,可用于研究菌株NQG8Ⅱ4在枸杞中的侵染定殖以及对枸杞促生抗病机理。