论文部分内容阅读
目的:制备特异性抗人丙氨酸氨基转移酶(AlanineTransaminase,ALT)单克隆抗体并鉴定其特性。方法:用纯化的ALT抗原免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用间接ELISA筛选杂交瘤细胞,阳性孔经三次有限稀释法克隆。用ELISA检测腹水及上清的抗体效价和相对亲和力。用Western blot检测McAb的特异性。用秋水仙素阻断法进行染色体分析。结果:得到1株杂交瘤细胞株,其染色体数目为95~106。其分泌的抗体为IgG1,轻链为κ型。上清和腹水抗体效价分别为10-4和10-6。PAGE后Westernblot结果显示该株McAb可与人血清中的ALT结合。结论:该杂交瘤细胞株能分泌抗人ALT的特异性McAb,为ALT免疫金标诊断试剂的研制提供了工具。