慢性牙周炎是造成全球慢性疾病负担的两种最重要的口腔疾病之一,也是主要的公共卫生问题。慢性牙周炎的治疗以手工清创、修整牙周组织外形以减少菌斑滞留为主,常见的辅助药物也集中在抗菌作用上,如盐酸米诺环素等药物。随着相关研究的不断深入,机体自身炎性反应对牙周组织破坏的影响越来越受重视,相应的免疫调节药物也逐渐被应用于控制牙周炎性反应,有可能成为未来牙周治疗的研究方向之一。整合素α9（ITGA9）是细胞膜上受体整合素家族的成员之一,仅出现在脊椎动物中,于1991年被发现,1993年正式命名。在近30年的研究中,各类研究报道了整合素α9在生长发育、伤口愈合、癌症、免疫疾病中均发挥了一定的作用,尤其是在类风湿性关节炎中,向患有关节炎小鼠的关节腔中注射整合素α9的抗体可有效降低炎症反应,抑制关节肿胀和骨吸收的发生;类风湿性关节炎和慢性牙周炎均可破坏周围骨结构及软组织,一些研究报道两者在发病机制及病理过程上拥有一些共同特点,但目前还缺乏整合素α9在牙周炎中的研究。因此,我们尝试探索整合素α9是否参与了慢性牙周炎的发生发展,为未来牙周炎的治疗提供更多可能的靶点。本研究拟探讨整合素α9及其配体是否在慢性牙周炎的内稳态中发挥了作用,并探索相应的分子信号作用机制。分为以下三个部分:实验一慢性牙周炎患者牙龈中整合素α9的表达分析目的:探索慢性牙周炎患者的牙龈组织中整合素α9的表达变化。方法:收集牙周翻瓣术手术（已经过基础治疗）中切除的炎症性牙龈组织,和牙冠延长术及种植体二期手术中切除的健康牙龈,进行HE及免疫组化染色,软件扫描分析阳性比率。结果:慢性牙周炎患者牙龈组织炎性浸润明显,并且在上皮和固有层组织的细胞膜上ITGA9的表达水平均明显高于健康组。结论:在慢性牙周炎的微环境下,牙龈组织内的整合素α9表达升高。实验二慢性牙周炎患者龈沟液中整合素α9的配体及炎症因子分析目的:检测在慢性牙周炎组与健康组的龈沟液中整合素α9配体肌腱蛋白C、骨桥蛋白及炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β含量的差异。方法:从初诊的慢性牙周炎患者（未经牙周治疗,牙周袋≥5mm）及健康人群（牙周袋<2mm,无附着丧失）的第一磨牙收集龈沟液,用ELISA测定肌腱蛋白C的含量,用BCA技术检测骨桥蛋白、TNF-α、IL-6、IL-1β的含量。结果:慢性牙周炎患者第一磨牙的龈沟液中肌腱蛋白C与健康组间有明显差异（P<0.05）,而骨桥蛋白则无统计学差异（P=0.829）。慢性牙周炎组和对照组之间的TNF-α（P<0.05）和IL-1β（P<0.01）有统计学差异。如不对称t检验的结果所示,在慢性牙周炎组中,IL-6的平均表达水平较高,但不认为有显着差异（P=0.2028）。结论:慢性牙周炎患者的龈沟液分泌肌腱蛋白C及炎症因子增多,但骨桥蛋白没有明显变化。实验三整合素α9在人牙周膜成纤维细胞中的表达及调控机制研究目的:分析整合素α9及其配体在人牙周膜成纤维细胞中的表达及发挥的作用,探讨相关的信号通路转导途径。方法:（1）体外培养原代牙周膜成纤维细胞,细胞免疫荧光染色观察是否表达整合素α9。（2）加入TNF-α（20ng/m L）刺激细胞,观察细胞表达整合素α9及其配体的m RNA水平的变化。（3）应用小干扰RNA敲低牙周膜成纤维细胞中整合素α9的表达,检测敲低效率并分析炎性细胞因子的变化,使用western blot检测p-Erk1/2、Erk1/2、p-JNK、JNK、p-p38、p38的表达变化。结果:（1）人牙周膜成纤维细胞表达整合素α9。（2）在TNF-α刺激下,牙周膜成纤维细胞会表达整合素α9、肌腱蛋白C及骨桥蛋白增多。（3）ITGA9基因敲低至40%就可以显著抑制牙周膜成纤维细胞分泌IL-1β、IL-6和IL-8。Western blot分析表明,敲低ITGA9抑制了Erk1/2、JNK、p38的磷酸化比率,提示丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号家族可能参与了这一反应。结论:人牙周膜细胞在炎症环境下表达整合素α9及其配体肌腱蛋白C增多,敲低α9可以减少炎症刺激下白介素因子的分泌,MAPK家族参与了这一信号调控。