集成浓度梯度与细胞相互作用的一体化药敏芯片的构建及其相关应用研究

来源 :上海交通大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bosimao_wang
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
浓度梯度反应是生物医药研究的一个重要组成部分。生化分子与相关细胞反应的深入研究将有助于我们进一步了解生命机制。然而目前在宏观尺度下生成浓度梯度的方法存在如下问题:①无法在反应体系小于微升级时仍保持浓度梯度的准确性;②难以形成特殊或复杂的浓度梯度。微流控技术主要用于微尺度下流体的控制,它反应体系小,检测速度快,可以将多种化学与生物反应功能集成在一张芯片上。本文基于微流控技术,提出了一种基于微流体振荡混合的大范围浓度梯度与细胞相互作用的一体化药敏芯片,用于结肠癌细胞的片上药敏反应。除此之外,本文还提出了一种基于环形微阀门的快速混合方式,并用于细菌的药敏检测。本文的主要内容如下:1、提出并制备了一种集成片上隔绝与快速混合功能的新型气动辅助环形微流控混合器(Pneumatic assisted ring mixer,PARM)。多层微流控芯片中经典的Quake阀门,仅能控制流体在轴向上的流动与停止。我们设计了一种环形气动微阀门,并使用染料实验进行了定性与定量验证。作为应用验证,我们使用PARM捕获GFP标记的大肠杆菌,并测定了在50、100、200、400μg·mL-1浓度奇霉素下,GFP标记大肠杆菌的增殖曲线。该设计可实现4 nL体系不同液体在2秒内的快速混合,可用于片上细胞或细菌的药敏检测。2、提出并制备了基于微流体振荡的大范围浓度梯度芯片。该设计可通过改变样品腔室与缓冲液腔室的体积比,实现2-fold或5-fold的顺序稀释倍数,通过6级稀释,最大可达到1:56级别的浓度。在振荡混合芯片的下游,我们设计了静态液滴微阵列(Static droplet array,SDA)结构,用于将生成的浓度梯度自离散为微液滴并储存备用。3、在上述大范围浓度梯度芯片基础上,设计并制作了用于肿瘤细胞培养与药敏检测的微流控芯片。该芯片在单片上集成了药物浓度梯度形成、细胞在片培养及药物浓度细胞相互作用等功能。作为应用验证,我们利用该芯片首先实现Lovo与HT29两株结肠癌细胞系的在片培养24小时,并在芯片上生成化疗药物5-氟尿嘧啶(Fluorouracil,5-FU)的浓度梯度并储存在储液腔中。通过片上药敏反应我们发现Lovo在5-FU浓度高于750 ug·mL-1时,IR显著下降,而HT29在5-FU浓度高于375μg·mL-1时,IR显著下降,且Lovo对5-FU的敏感性高于HT29。综上所述,本文提出了一种大范围浓度梯度与细胞相互作用的药敏芯片,实现了单片上集成了药物浓度梯度形成、细胞在片培养及药物浓度细胞相互作用等功能。除此之外,本文还设计了一种基于环形微阀门的快速混合微流控芯片,并将其用于细菌的片上药敏检测。
其他文献
为了探讨单孔胸腔镜肺大疱切除术在自发性气胸中的治疗效果及安全性,本研究选取自发性气胸患者70例,根据随机数字表法将患者分为对照组(n=35)与研究组(n=35)。研究组采取单孔胸腔镜肺大疱切除术,对照组采取双孔胸腔镜肺大疱切除术。统计两组手术情况(手术时长,术中失血量,术后引流量,留置引流管时间,住院时间)、术后(术后即刻,术后12 h,术后24 h)疼痛程度(VAS)分值、并发症发生率,随访6~
自中国进入工业时代以来,全国各地空气质量都受到了一定影响,空气质量指数预测成了一项重大工作。以长沙市为例,采用主成分分析得出影响该地区空气质量的3大指标,再通过多元线性回归得出空气质量指数与3大指标的多元线性回归方程,最终得出空气质量指数与PM2.5、PM10、SO2、CO、NO2、O36项空气污染物质量浓度的多元线性回归方程。实现了主成分分析与多元线性回归方程的结合,提高了预测模型的精度。
苏南义庄建筑作为稳定传统社会秩序和帮助贫困族人的重要建筑遗存,承载了丰厚的文化意义。苏南义庄建筑及其文化研究不仅是建筑学领域的课题,还对乡村社会治理、文化传承等方面起着重要作用。本文以苏南地区为研究范围,选择明清时期的义庄建筑遗存作为研究对象。通过对苏南义庄建筑的测绘与调研,深入研究建筑的功能、空间与结构、空间界面及装饰艺术,结合非物质形态研究,探讨苏南义庄建筑是否具有自身特色。全文分为三大部分,
高考是关系到高中生未来发展方向的重要考试,教师和学生都给予了极高的重视。尤其是高三学生在高考之日逐渐逼近时,会出现各种心理状况。为了让学生以良好的状态迎接高考,教师需对学生开展考前心理辅导课,疏导学生不良的考前心理。因此,本文主要针对高考前心理辅导课的有效辅导方式展开分析。
甘肃简牍在中国艺术史上占据着重要的地位,从二十世纪以来,随着甘肃考古的重大挖掘,在甘肃境内相继出土了六万多枚简牍,出土数量为全国之最,无论在出土数量上、还是在历史价值上以及时间跨度上都占据着重要的地位,
期刊
第二次世界大战期间,国际局势的变化促使美国亟须建立现代情报共同体并大力招募专家学者,同时不少社会科学知识分子出于个人理想抱负和人际关系网络的影响,也主动选择从事情报工作,于是“官智合流”的现象在战略情报局尤其是研究分析处这一部门集中体现出来。研究分析处采用团队合作、多学科协同及运用客观推理解决具体实际问题的模式开展工作,学者们在工作中克服了诸多困难,为反法西斯战争的胜利作出了重要贡献。二战期间美国
日本学界早在1994年就对第1855部队编成时间有可信结论,但国内学界1997年以来至今还在“争论”此问题。权威的日方战时档案文献表明,第1855部队编成时间为1938年2月9日至1939年5月10日。考察第1855部队编成问题应置其于整体的日军防疫给水和细菌战背景下进行宏观认知。尽管第731部队派遣“太田部队”援建该部时就预设了细菌战目标,但该部最初是为满足日军全面侵华后各部队防疫给水的需要而组
《金锁记》是张爱玲作品中一部极具悲剧性的作品。长安的形象深入人心。本文拟从女性心理、言语虐待及社会性等角度分析长安从沉默走向灭亡的悲剧命运,从而探索作者塑造长安这一形象的深长意味。
张爱玲的《金锁记》讲述了麻油西施曹七巧被当作联姻工具,被迫嫁给残疾的姜家二少爷,等级森严的旧式封建家庭让没有身份地位的她常年精神压抑,她暗恋的三少爷季泽也只不过把她当成是调情工具。追爱失败的曹七巧把失去爱情的痛苦转嫁到他人身上,把女儿长安当作复仇对象,这种做法其实是曹七巧在封建思想和传统女教思想影响下产生的一种近乎变态的挣扎与反叛。在物欲横流的都市生活与封建主义金钱观的双重作用下,曹七巧的青春也随