淫羊藿对骨细胞分化的作用及CD44、FN的表达影响

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目的:通过建立Wistar大鼠成骨细胞和破骨细胞体外培养模型,探讨淫羊藿在成骨细胞和破骨样细胞形成中的作用,以及粘附分子CD44和FN的表达和作用,进而为淫羊藿治疗骨质疏松症的提供分子学依据。方法:[1]分别用淫羊藿含药血清、地塞米松诱导培养Wistar大鼠骨髓间充质干细胞培养8天,分为M组、D组和C组(空白对照组),于第二天、第五天、第八天三组进行Giemsa染色,免疫细胞化学染色,第八天进行茜素红(ARS)染色,染色结果由IPP图像分析软件计算后,经SPSS13.0统计软件分析。[2]用RANKL和M-CSF共同诱导Wistar大鼠全骨髓细胞分化形成破骨样细胞,且添加淫羊藿含药血清、CD44抗体进行干预培养,分为M组、A组和C组(空白对照组),于第三天、六天、九天对其进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色(TRAP),Giemsa染色,免疫细胞化学染色,染色结果由IPP6.0图像分析软件计算后,经SPSS13.0统计软件分析。结果:[1]①M组和D组有大量的矿化结节形成,并且淫羊藿含药血清组较地塞米松组明显,C组矿化结节的形成作用不显著。②M组、D组和C组三组细胞的单个细胞CD44的表达没有显著性差异。③M组与D组细胞单个核细胞FN的表达显著性低于C组,但在成骨细胞分化成熟期,M组和D组FN表达增加值明显高于C组。[2]①M组、A组和C组均有TRAP阳性细胞的形成,每组细胞中TRAP阳性细胞的形成率存在着显著性差异,C组>A组>M组。②三组细胞中圆形单核细胞胞浆中FN呈强阳性表达,多核融合细胞胞浆中FN呈阳性表达。结论:①淫羊藿不仅具有促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化、增殖的作用,还能够抑制全骨髓细胞分化为破骨样细胞。②在骨组织中,淫羊藿可能通过调节CD44的表达,调节破骨样细胞的形成与凋亡。③淫羊藿能通过调节FN的表达来调节骨形成与骨吸收。
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