论文部分内容阅读
目的冠心病在我国仍为多发病,而冠状动脉搭桥等血运重建手段常伴随着静脉动脉化的过程。C -反应蛋白(CRP,急性时相反应蛋白)是一个能独立的预测冠状动脉综合征,血管反应损伤程度的重要炎性因子。C反应蛋白(CRP)又是全身及局部炎症的一种敏感的炎性标志物,C反应蛋白在自体静脉移植动脉化过程中被发现并且与动脉粥样硬化是紧密的联系在一起的,但其在移植静脉早期及内膜增生过程中是否参与尚未完全被证实。然而CRP与自体静脉桥移植动脉化后有关研究较少。本研究通过建立大鼠自体颈静脉动脉化模型,模拟CABG术后生理过程,应用高度选择性的p38MAPK抑制剂CBS3830干预,研究CRP的变化,探讨CRP在静脉动脉化过程中的作用及意义,试图揭示CRP在静脉动脉化后静脉桥再狭窄过程中所扮演角色,为进一步预防桥血管的再狭窄及防止内膜增生提供新的途径。方法将70只SPF级SD雄性大鼠(8-10周龄,体重200~220g),随机分为假手术组(sham group, n=10)、对照组(control group,n=20 )、单剂量组(single dose group,n=20)、双剂量组(double doses group,n=20)。采用改良cuff法建立自体静脉移植动脉化模型,其中假手术组仅模拟手术过程,不进行血管移植和药物干预;对照组进行颈静脉至颈动脉的移植,且移植前1h给溶剂(Solvent,甲基纤维素)一次,3mg/kg干预;单剂量组进行血管移植,且移植前1h给新型的p38MAPK抑制剂CBS3830一次,3mg/kg;双剂量组进行血管移植,且移植前1h和移植后4d分别给予CBS3830一次,3mg/kg/次。实验共分6个时间点进行检测:T0为术前0h,T1为术后24h,T2为术后48h,T3为术后4d,T4为术后1w,T5为术后2w,并在这6点(T0,T1,T2,T3,T4,T5)分别取血清,ELISA法进行CRP的检测;而术后2w静脉桥血管取材进行HE染色,通过计算机图像分析系统测定内膜、中膜的厚度变化;蛋白印迹技术(western blotting)测定P-38;P-P38表达。结果在0h～2w期间,CRP在对照组(control)、单剂量组(single-dose)和双剂量组(double-doses)均有上升趋势,仅假手术组(sham)在24h后表现为缓慢下降。在各时间点,单剂量组、双剂量组分别与假手术组(sham)、对照组(con)比较均不具有差异性(P>0.05),而仅在1w和2w时间点时,单剂量组、双剂量组分别与假手术组比较有统计学差异性(p=0.025和p=0.015)HE示时间点(1w)单、双剂量组内膜、中膜增生明显低于对照组,差异具有统计学意义(p<0.05或p<0.01);单、双剂量组内膜、中膜增生厚度明显高于假手术组,有显著性差异(p<0.01),但各时间点单、双剂量组比较均无差异(p>0.05)。Western blotting检测示p38及P-p38的产物示单、双剂量组明显低于对照组、假手术组,有显著统计学差异。结论C -反应蛋白(CRP)与自体静脉桥移植再狭窄过程关系密切,其机制可能与p38MAPK通路有关,CRP参与了静脉动脉化再狭窄的过程,且CBS3830对其没有起到明显的抑制作用.深入研究有望成为防治CABG术后静脉桥再狭窄及闭塞的新靶点。