【目的】:本研究基于“精-血-髓一体理论”,即血既能滋养肾精,以精化髓,又能直接入颅充养脑髓。实验研究选择血管性痴呆动物大脑海马CA1区为观察区域,以星形胶质细胞形态、数量变化及缺血区微血管新生密度改变为具体观察指标,通过研究VD模型大鼠学习记忆能力、脑组织形态学、GFPA表达免疫阳性细胞数目、微血管新生变化与不同当归补血汤治疗剂量的关系,来论释当归补血汤治疗血管性痴呆的现代生物学基础,并寻找当归补血汤治疗血管性痴呆的最佳量效点,为进一步推广“精-血-髓一体论”的临床应用寻找理论依据及科学支撑。【方法】:选用雄性SD大鼠为实验对象,以改良后Pulsinelli四血管阻断法(4-vo)进行血管性痴呆造模。术后七天观察模型大鼠行为表现并按神经功能缺损程度进行评分,剔除造模失败及神经损伤过重无法完成实验者,其余选取进入实验。实验分为正常组、假手术组、VD模型组、VD模型+低剂量当归补血汤组、VD模型+中剂量当归补血汤组、VD模型+高剂量当归补血汤组。根据实验需要进行使用不同药物及剂量,每日灌胃一次,共干预90天,行Morris水迷宫试验检测各组大鼠行空间认知能力改变。水迷宫后提取各组大鼠脑组织。以苏木精-伊红(HE)染色,于光镜下观察脑组织形态学;对血管内皮细胞标志物第Ⅷ因子进行免疫组化染色观察脑组织缺血灶周围微血管密度;应用免疫荧光标记技术检测各组大鼠海马区GFAP(胶原纤维酸性蛋白)表达免疫阳性细胞数目。对不同剂量下的各项指标进行比较,观察当归补血汤剂量对各项指标改变程度的影响,分析当归补血汤改善VD大鼠学习记忆能力的原因。【结果】1、Morris水迷宫行为学测试结果:水迷宫逃避潜伏时间,各VD、VD模型+当归补血汤组与假手术组比明显延长,差异显著(P<0.01);正常组与假手术组相比无差异(P>0.01);全部VD模型+当归补血汤组与VD模型组相比明显缩短,差异显著(P<0.01);VD模型+高剂量当归补血汤组与VD+中剂量、VD+低剂量组相比,时间依次缩短,差异显著(P<0.01);2、形态学观察:正常组及假手术组海马CA1区神经元的细胞形态、分布正常,几乎无变性、坏死神经元。VD模型组,及各剂量当归补血汤组CA1区可见噬神经现象,凋亡神经元及星形胶质细胞增生。3、GFAP表达免疫阳性细胞计数结果VD模型组,VD模型+各剂量当归补血汤组与正常组、假手术组相比,其GFAP表达数目明显增高,差异显著(P<0.01)。VD模型组与VD模型+低剂量当归补血汤组比较GFAP表达数目无明显差异(P>0.01)。VD模型组,VD模型+中剂量当归补血汤组,VD模型+高剂量当归补血汤组,GFAP表达数目依次增加,各组间差异显著(P<0.01)。正常组与假手术组无明显差异(P>0.01)。4、缺血脑组织微血管密度检测结果:VD模型组,VD模型+各剂量当归补血汤组与正常组、假手术组相比,微血管密度增高,差异显著(P<0.01)。VD模型组与VD模型+低剂量当归补血汤组比较微血管密度无明显差异(P>0.01)。VD模型组,VD模型+中剂量当归补血汤组,VD模型+高剂量当归补血汤组,缺血灶及周边组织微血管密度依次增加,各组间差异显著(P<0.01)。正常组与假手术组无明显差异(P>0.01)。【结论】:1、当归补血汤可有效改善VD大鼠的学习记忆能力,其改善作用与用药剂量相关,并在一定范围内随剂量增加而提高,本实验中,以1.08g/kg·d剂量的当归补血汤改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力效果最好。2、当归补血汤可增强缺血组织周围血管新生,促进海马CA1区反应性星形胶质细胞增殖,其促进血管新生、反应性星形胶质细胞增殖的水平在一定范围内随剂量增加而提高。3、当归补血汤对VD大鼠的治疗作用可能与其促进缺血后受损脑组织微血管新生、反应性星形胶质细胞增殖,改善血氧供应,营养修复神经元作用有关。