人红系终末分化中不同期幼稚细胞的分离和功能研究

来源 :中南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiao678
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
红血球的生成,是造血干细胞定向往红细胞发育,成熟的过程,是一个连续而又具有阶段性的过程。血型糖蛋白A的出现表示红系终末分化的开始,细胞从原成红细胞开始向嗜碱性幼红细胞,嗜多色性幼红细胞,正染色幼红细胞增殖分化,最后细胞脱核后变成网织红细胞。网织红细胞经过成熟变成成熟红细胞后通过骨髓进入血液循环系统。本文建立了一个稳定的模拟红系体内发育的培养体系,并运用蛋白质印迹实验和流式细胞学分析法检测了数十种红系发育相关的膜表面蛋白,骨架蛋白以及跨膜蛋白在培养过程中表达水平的变化。实验结果表明,Band3在发育过程中上升的幅度最为明显而α4integrin,一种粘附分子,先是保持高表达水平,而后降至最低。我们选取了Band3和a4integrin这两个变化最大的膜蛋白作为标记物,搭配血型糖蛋白A,红系的特异性标记物,对我们的培养体系的分化过程进行了监测,并选取了第7天和第14天的细胞进行流式细胞分选。我们在第7天的细胞中得到了具有形态学特征的原成红细胞,早期嗜碱性幼红细胞,晚期嗜碱性幼红细胞和嗜多色性幼红细胞,我们在第十四天的细胞中得到了具有形态学特征的嗜多色性幼红细胞和正染色幼红细胞,流式细胞分选得到的细胞纯度达到90%以上。为了检测这些细胞是否具有各个期该有的功能,我们对这些细胞进行培养,细胞计数以及做生长曲线,实验结果表明原成红细胞可以分裂4次,早期嗜碱性幼红细胞可以分裂3次,晚期嗜碱性幼红细胞可以分裂2次,嗜多色性幼红细胞可以分裂1次,正染色幼红细胞不能再分裂,这说明我们流式分选得到的各个期的细胞具有了红系终末分化中个幼稚细胞的有丝分裂能力。我们将这三个标记物运用到正常人的骨髓中,并将人骨髓进行流式细胞分选,我们在正常人骨髓中得到了纯度高达90%以上的各个期的细胞。我们将7个正常人骨髓的有核红细胞进行统计学分析,发现在正常人的骨髓中,我们得到的成原红细胞:早期嗜碱性幼红细胞:晚期嗜碱性幼红细胞:嗜多色性幼红细胞:正染色幼红细胞的比例达到了预测了1:2:4:8:16。而当我们运用这三个标记物到骨髓异常增生综合症的病人身上时,发现他们骨髓中红系发育终末阶段的情况发生了变化。我们在本研究中发现了建立了稳定的红系体外诱导培养体系,并且发现了红系发育的独特标记物。该标记物的发现能让我们能够得到大量的不同期的红系终末发育的有核红细胞,以便于让我们更深层次的对红细胞的分化和发育进行研究,也让我们可以将不同期的有核红细胞进行RNA测序,DNA测序等方面的分子生物学研究。红系特异性标记物的发现也能让我们将其投入临床应用中,帮助诊断时期专一性的血液疾病以及跟红系发育相关的血液系统疾病例如骨髓衰竭等。
其他文献
目的:探讨心率过快及心率波动对冠状动脉图像质量的影响。方法:回顾性分析搜集心率过快及心率波动患者366例,根据心率过快程度分为3组,再将每组病例按照心率波动范围分为4个亚组
各省、自治区、直辖市、计划单列市科技、教育、国资厅(委、局)、科协,中科院各分院、研究所,新疆生产建设兵团科技、教育,国资局、科协,国务院有关部门科技主管司(局):根据党中央、国
细胞内蛋白质相互作用的研究是目前生命科学研究的热点领域,这些研究有助于我们了解蛋白质功能,以及阐明信号通路转导过程,进而揭示生命的奥秘。随着科学技术的进步,我们目前拥有
针对数字图像处理课程的特点,提出了一种从工程应用实例现象的演示到理论分析,再到处理算法的设计实现,最后在工程实践中应用图像处理算法的教学模式;实践表明:这种教学模式不
随着教育教学改革不断向纵深发展,多媒体教学作为一种全新的教学系统走进课堂。本文分析了多媒体技术在人体寄生虫学实验课教学中应用的优点和应注意的问题。
期刊
本文从常规原料、饲料添加剂、饲料配方技术、饲料加工技术几个方面论述了优质环保饲料生产技术与应用现状。
ue*M#’#dkB4##8#”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:(100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技
今日(10月31日),中国营养学会发布《预包装食品“健康选择”标识使用规范》(试行),正式启用统一的包装正面标识——“健康选择”标识,通过制定减少油、盐、糖的系列营养标准规则
提高中职班主任德育工作的实效性对促进中职德育工作的开展具有重要的推动作用。目前,中职学校的德育工作存在很多问题,如班主任开展学生德育工作缺乏方法和策略,导致学生问