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本文以乙醇提取和超临界二氧化碳萃取两种方法制备的蜂胶提取物为研究对象,通过测定两种蜂胶提取物的有效化学组分,测定其对五种常见肉品污染菌及对真空包装4℃低温保藏的冷却牛肉表面混合菌的抑菌效果。探索研究两种蜂胶提取物在冷却牛肉保鲜中的作用效果。主要实验结果如下:1、采用滤纸片扩散法测定蜂胶乙醇提取物和超临界萃取物溶液,在浓度为0.1 %、0.5 %、1.0 %、1.5 %、2.0 %、2.5 %条件下,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、蜡样芽孢杆菌、产黄青霉和牛肉表面混合菌六种供试菌的抑菌作用,结果表明:两种蜂胶提取物溶液浓度越高,抑菌作用越强;两种蜂胶提取物对革兰氏阳性菌抑菌作用较好,对革兰氏阴性菌抑制作用不显著。2、通过对普通加热处理、微波处理和超声波处理三种预处理方法的比较,超声波处理对蜂胶提取物抑菌作用的提升效果最为理想。3、蜂胶提取物保鲜剂配方优选研究(1)根据单因素影响效应试验,得到以冷却牛肉的1/TVB-N值为Y值,以蜂胶提取物溶液浓度(X1)、超声波处理时间(X2)、超声波功率(X3)与超声波频率(X4)作为编码值为自变量的数学模型如下:蜂胶乙醇提取物溶液处理组的回归方程为: YA =0.07116+ 0.00689X1+0.00288X2+ 0.00409X3- 0.002182X4+ 0.00318X12+ 0.00244X22-0.00096X32 -0.00432X42 -0.00291X1X2+ 0.00023X1X3-+0.00043X1X4 -0.00394X2X3 -0.00339X2X4+ 0.00109X3X4蜂胶超临界萃取物溶液处理组的回归方程为: Ys=0.0652+0.00664X1-0.00293 X2+0.00473 X3+0.00155 X4+0.00340 X12-0.00161 X22-0.00258 X32-0.00313 X42-0.00358 X1X2-0.00124 X1X3+0.00010 X1X4+0.00115 X2X3-0.00016 X2X4-0.00038 X3X4(2)各因素对冷却牛肉TVB-N值的影响由大到小依次为:蜂胶乙醇提取物组,溶液浓度>超声波功率>超声波处理时间>超声波频率;蜂胶超临界萃取物组,溶液浓度>超声波功率>超声波处理时间>超声波频率。(3)两种蜂胶提取物最优处理方案分别为:蜂胶乙醇提取物溶液浓度2.0 %、超声波处理时间150 s、超声波功率400 W、超声波频率60 KHz;蜂胶超临界萃取物溶液浓度2.0 %、超声波处理时间150 s、超声波功率350 W、超声波频率60 KHz。(4)因子间交互作用分别为:蜂胶乙醇提取物组:超声波频率和超声波处理时间两因子同在较低水平时,具有协同增效作用;超声波功率和超声波频率具两因子具有协同增效作用。蜂胶超临界萃取物组:溶液浓度和超声波功率两因子同在较高水平具有协同增效作用;溶液浓度和超声波频率两因子具有协同增效作用。4、先采用测定TBARS值、菌落总数和汁液流失率,再应用模糊综合评判法评价冷却牛肉的综合保鲜效果,结果表明:经过蜂胶乙醇提取物和超临界萃取物溶液保鲜剂处理的冷却牛肉的感官品质远高于处理的冷却牛肉的测试值和感官品质。验证了两种蜂胶提取物对冷却牛肉的保鲜作用。5、以木犀草素、高良姜素、芹菜素、山奈酚、杨梅酮、柯因、芦丁、槲皮素八种黄酮为标准品,采用HPLC对两种方法得到的蜂胶提取物进行黄酮组分及含量分析,结果表明:蜂胶乙醇提取物中有6种与测试标品相同成分的黄酮类化合物,6种黄酮类化合物总量为16.32 %。蜂胶超临界萃取物中有2种与测试标品相同成分的黄酮类化合物,2种黄酮类化合物总量为3.17%。并参考蜂胶乙醇提取物和超临界萃取物的GC-MS测定结果,分析蜂胶乙醇提取物和超临界萃取物中萜烯类物质,酚、醇类物质,醛、酮类物质以及芳香酸及芳香酸酯类物质等挥发性化合物含量。