敲低FBP1对人肝癌细胞生物学特性的影响

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目的据有关文献报导,FBP1在肺癌、乳腺癌、肾癌、胃癌几种癌症类型中发现对肿瘤发生和发展起关键作用。结合课题组之前的研究结果,在三株不同转移潜能的肝癌细胞株中所筛选出的差异表达蛋白,与糖酵解/糖异生的相关性排名前列,FBP1作为糖异生反应的限速酶之一,我们猜测其对人肝癌细胞的侵袭迁移有影响。因此,本课题通过慢病毒载体介导siRNA敲低肝癌MHCC97-H细胞中FBP1基因,试图探讨该基因对MHCC97-H肝癌细胞生物学特性的影响,探明FBP1基因是否为影响肝癌细胞生物学效应的靶向基因,从而为抑制肝癌转移侵袭的分子靶点提供新的实验依据。方法1.验证MHCC97-H、HCCLM3、MHCC97-L细胞株间FBP1基因的差异表达;2.慢病毒感染肝癌细胞株MHCC97-H,筛选稳定敲低FBP1i的细胞株并验证;3.对FBP1i细胞株进行体内、外肿瘤生物学行为进行验证。结果1.WB法检测在HCCLM3细胞株中FBP1表达高于MHCC97-H及MHCC97-L细胞株;稳定敲低细胞株FBP1i的FBP1基因的蛋白条带较对照Scrambled细胞明显减少;2.在细胞生长,周期,凋亡,迁移等方面,FBP1i与对照组MHCC97-H及Scrambled细胞株之间无明显的差异(p>0.05);FBP1i的乳酸产生量明显高于对照组(p<0.05),线粒体有氧呼吸较对照组减弱;3.裸鼠肝原位接种实验均未见转移。结论FBP1基因对肝癌MHCC97-H细胞的侵袭、迁移无明显影响。
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