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烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus,TMV）为正义单链RNA病毒,其结构简单,寄主广泛,且稳定性强。TMV以机械传播为主,是威胁烟草等多种茄科作物的重要病原之一。RBP（RNA-binding proteins）是真核生物中广泛存在的一类蛋白,在植物应对生物胁迫与非生物胁迫中发挥重要作用,特别是参与植物调控RNA病毒侵染途径。本论文以普通烟草内源基因NtRBP45为研究对象,初步探索了其在寄主应答TMV侵染过程中可能的作用机制,获得主要结果如下:（1）TMV侵染珊西烟引发NtRBP45上调表达利用RT-qPCR分析TMV侵染珊西烟中NtRBP45的转录表达,结果显示NtRBP45转录水平在接种TMV后显著上升,在3 d时达峰值,表明TMV侵染普通烟草后引发NtRBP45的上调表达。因而,推测NtRBP45表达量升高可能有助于烟草抵御TMV侵染。（2）NtRBP45主要定位于细胞核构建植物表达载体pNtRBP45-GFP、pNtRBP45N△-GFP、pNtRBP45C△-GFP、pNtRBP45N△C△-GFP、pNtRBP45N-GFP,分别导入农杆菌EHA105,对NtRBP45及其缺失突变体进行亚细胞定位分析。结果显示NtRBP45-GFP在细胞膜、细胞质中均有分布,但绝大部分位于细胞核;NtRBP45N△C△-GFP、NtRBP45N△-GFP、NtRBP45C△-GFP与NtRBP45-GFP亚细胞定位类似,但NtRBP45N-GFP在细胞核中分布相对减弱。因此,推测NtRBP45的中间区域（67-372 aa）可能包含指导蛋白进入细胞核的重要序列。（3）瞬时表达NtRBP45引发本氏烟叶片坏死,激发H2O2积累构建植物表达载体pCamNtRBP45、pCamNtRBP45N△、pCamNtRBP45C△、pCamNtRBP45N△C△、pCamNtRBP45N,分别导入农杆菌EHA105,注射6周龄本氏烟的成熟叶片。结果显示:注射6 d后,NtRBP45和NtRBP45C△引发叶片出现坏死,且前者表型比后者更明显,而其他均无任何变化。DAB染色分析显示NtRBP45瞬时表达激发了H2O2的积累,而在四个突变体中,仅C-端缺失突变体NtRBP45C△能够激发微量H2O2积累,由此暗示NtRBP45 N-端为关键功能区。（4）瞬时过表达NtRBP45促进RNA沉默将含有pCamNtRBP45或pCAMBIA-35s-GFP的农杆菌液共注射16c本氏烟,同时用含有p35S-T2b或pCAMBIA1350.1的农杆菌液与pCAMBIA-35s-GFP共注射作为对照。处理三天后,收集样品,提取RNA,Northern blot分析显示NtRBP45促进了gfp siRNA积累。由此分析,NtRBP45具有促进RNA沉默的功能。进一步研究表明缺失突变体NtRBP45N△、NtRBP45C△、NtRBP45N△C△、NtRBP45N均丧失促进RNA沉默的功能,仅有全长NtRBP45表现此功能。（5）制备表达NtRBP45的转基因植物利用叶盘法将NtRBP45导入本氏烟,获得37个转基因株系。随机取6个转基因株系的T1代植株,接种丁香假单胞Pst DC3000?HopQ 1,6天后菌落计数显示4个株系的菌落数显著低于野生型,暗示过量表达NtRBP45能够提高本氏烟对Pst DC3000?HopQ 1的抗性。利用蘸花法转化拟南芥,获得20个转基因株系。对T1代转基因植株表型进行观察,结果显示转基因植株自第8-9个莲座叶出现叶片坏死,生长后期植株弱小早衰。综上所述,本论文分析了NtRBP45表达的时空特征,发现NtRBP45具有诱发H2O2积累和增强RNA沉默的功能,并研制了表达NtRBP45的转基因植物材料,为进一步开展NtRBP45的功能研究奠定了基础。