狼尾草属牧草的形态学及其SCAR标记分析

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:tianwang782
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本研究以福建农林大学试验地的狼尾草属牧草的为试验材料,研究了形态学标记,优化了 RAPD-PCR、ISSR-PCR反应程序及反应体系,通过形态学和RAPD标记、ISSR标记分析了狼尾草属牧草遗传多样性,并将RAPD及ISSR标记中的特异性条转化为SCAR标记。结果如下:10个狼尾草属牧草扦插苗经8个月生长后,测量植株自然高度、茎秆高度、茎粗、叶片长度、叶片宽度、节长、分蘖数、节数,统计叶片数,称量单主根重量共10个形态指标,以此进行差异分析,结果表明:10个品种的10个指标变异系数都较大,最小的为株高的9.76%,最大的叶宽48.48%。对这10个品种进行聚类分析可得,10个狼尾草属牧草可分三类,一类植株普遍高大,第二类叶片普遍较长,较宽。外形差异巨大的细茎象草为第三类。利用热研4号王草、杂交狼尾草对120条随机引物进行筛选,获得22条多态性好的引物。采用RAPD标记技术,通过22条随机引物,对14份狼尾草属牧草进行遗传多样性分析和聚类分析。>22条引物共扩增出258条条带,其中多态性条带199条,多态性比例77.1%,利用NTSYSpc 2.0进行聚类分析,共分为六类:杂交狼尾草单独聚为第一类;紫象草单独聚为第二类;巨菌草和热研4号王草为第三类;象草N51、象草N85聚为第四类;桂闽引象草、台湾甜象草聚为第五类;桂草1号王草、桂牧1号杂交象草、矮象草、莱牧1号象草、细茎象草聚为第六类。利用紫象草、细茎象草对95条ISSR引物进行筛选,获得17条多态性好的引物。采用ISSR标记技术,通过17条随机引物,对14份狼尾草属牧草进行遗传多样性分析和聚类分析。17条引物共扩增出256条条带,其中多态性条带232条,多态性比例90.6%,利用NTSYSPC 2.0进行聚类分析,共分为五类:紫象草单独聚为第一类;杂交狼尾草为第二类;桂闽引象草、台湾甜象草聚为第三类;象草N85、象草N51聚为第四类;巨菌草、热研4号王草、桂草1号王草、桂牧1号杂交象草、矮象草、莱牧1号象草、细茎象草聚为第五类。将RAPD标记中的S27、S42、S52、S71、S114引物和ISSR标记中的U55引物中产生的特异片段切胶、回收、测序,得到五个长度分别为428bp、405bp、519bp、700bp、242bp、358bp的序列,根据测序结果,分别设计五对特异性引物对SS27-7、SS42-11、SS52-6-2、SS71-8、SS114-12、U55-2,成功将四个RAPD标记和一个ISSR标记转化成SCAR标记,它们能将紫象草、热研4号王草、矮象草、莱牧一号象草、象草N85、象草N51与其他狼尾草属牧草品种区分开来。
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