鮸鱼IL-1β的miRNA调控研究

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免疫反应是机体在抵抗外源病原微生物的入侵下,做出的一种防御性反应,并通过一系列的生理过程,清除侵入机体的病原体。脊椎动物在不断的进化中,发展出了比较完备的免疫系统。免疫系统可以分为先天性免疫系统(Innate immune system)和适应性免疫系统(Adaptive immunity system)。对于低等脊椎动物来说,先天性免疫系统是其主要的防御系统。白细胞介素是一类重要的细胞因子,能够在炎症反应以及免疫反应中起到重要作用。在高等脊椎动物中,白细胞介素被较为广泛的研究,而在鱼类中则相对较少。其中,IL-1β是白细胞介素1家族中重要的促炎因子,能够与细胞膜上的相应受体结合,从而激活下游信号分子,起到级联放大的效果。microRNA(miRNA)是由内源基因编码的小分子单链RNA,miRNA可以通过特定的“种子序列”与靶基因mRNA结合,从而使得mRNA被降解或翻译受阻。近年来发现,miRNA能够参与到机体先天性免疫反应中,并作为负性调控因子调节免疫通路基因表达,以防止过度免疫。基于上述基础,我们做了以下的研究:(1)通过双荧光素酶报告基因实验,证明miR-144可以通过“种子序列”靶作用于IL-1β-3’UTR。然后构建miR-144前体质粒,证实鮸鱼前体miR-144同模拟体的作用趋势相同,都能够对IL-1β-3’UTR进行负性调控。(2)通过双荧光素酶报告基因实验,证实了miR-144可以靶向负调控IL-1β,从而下调了IL-1β激活的NF-κB信号通路。(3)通过免疫印迹实验,证明miR-144在转录后水平抑制IL-1β的mRNA,并影响IL-1β蛋白表达。
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