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研究目的:肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是全球男性中第五大常见癌症,女性中第七位,也是恶性肿瘤相关死亡的重要原因。肝癌前病变是肝硬化发展为肝癌的中间阶段,故有学者认为此过程是可逆的,早期采取干预措施则可有效预防肝癌发生,延长患者寿命,从而带来较大的经济效益。二术解毒汤是上海市名中医陈建杰教授根据中医学“未病先防、既病防变、治病求本”的学术思想确立的治疗肝硬化及肝癌的经验方。该方具有“健脾化湿、清热解毒、软坚散结”的功效,在实际临床中取得了较好的疗效,有很高的研究价值。本研究目的是评价二术解毒汤对二乙基亚硝胺(Diethylnitrosamine,DEN)诱导大鼠肝癌前病变的预防作用并初步探讨其分子作用机制。研究方法:62只SPF级雄性wistar大鼠,适应性饲养7天后,按体重随机分为6组:正常组8只、模型组14只、华蟾素组、二术解毒汤颗粒低、中、高剂量组各10只。模型组、华蟾素组、中药低、中、高剂量组腹腔注射DEN造肝癌前病变模型,二术解毒汤颗粒低、中、高剂量组每天灌胃剂量为0.525g/Kg、1.05g/Kg、2.1g/Kg,华蟾素组每天灌胃0.15g/Kg;正常组及模型组大鼠灌胃等剂量的生理盐水,各组灌胃体积均为5ml/Kg。在第16周末,灌胃结束后禁食12小时,戊巴比妥钠麻醉大鼠,腹主动脉取血,摘取肝脏、脾脏称重。检测指标:各组大鼠体重、肝脏、脾脏指数;ALT、AST、GGT等肝功能指标;肝脏HE染色;免疫组化检测肿瘤组织中GST-Pi、AFP、CK19、c-Myc、Ki67的表达,RT-PCR检测肿瘤组织中AFP m RNA、CK19 m RNA、c-Myc m RNA,YAP m RNA、TAZ m RNA的表达。研究结果:(1)与模型组相比,华蟾素组、二术解毒汤颗粒中剂量组体重显著增加(P<0.01);与二术解毒汤颗粒低剂量组相比,二术解毒汤颗粒中剂量组体重显著增加(P<0.05)。(2)模型组、华蟾素组以及二术解毒汤颗粒剂低、中、高剂量组大鼠从第4周开始出现进食较正常组明显减少,背毛倒竖,活动迟缓,精神萎靡,体重增长缓慢或者逐渐下降等表现。但华蟾素组以及二术解毒汤颗粒剂低、中、高剂量组程度均好于模型组。(3)与模型组相比,华蟾素组、二术解毒汤颗粒低、中、高剂量组肝脏指数、脾脏指数显著降低(P<0.01)。(4)大鼠肝脏形态,模型组大鼠的肝脏组织表面无光泽、粗糙、质地硬,色为暗红色,肝脏表面单发或满布大小不等的灰白色肿瘤结节改变,结节直径大小不等(0.5～1.5cm),或伴有不同程度的肝硬化,但未见腹水。华蟾素组、二术解毒汤颗粒低、中、高剂量组大鼠的肝脏组织表面光泽较暗、质地硬,颜色为暗红色,肝脏表面结节较少、较小。肝组织HE染色,模型组大鼠肝细胞出现不同程度变性、坏死,排列紊乱呈灶状、巢状、梁状排列,细胞呈多形性,胞核大,呈双核或多核,染色较深,密度增加,核质比增加,肝细胞明显发育不良,并伴有纤维组织増生,假小叶形成。与模型组相比,二术解毒汤颗粒中剂量组大鼠肝细胞变性坏死、排列紊乱呈巢状,结缔组织增生程度较轻,华蟾素组及二术解毒汤颗粒低、高剂量组大鼠肝细胞介于模型组与中药中剂量组之间。(5)与模型组相比,华蟾素组、二术解毒汤颗粒剂低、中、高剂量组可显著下调血清ALT、AST、GGT水平(P<0.01)。(6)与模型组相比,华蟾素组、二术解毒汤颗粒剂低、中、高剂量组GST-Pi、AFP、CK19、c-Myc、Ki67的表达明显降低。(7)与模型组相比,华蟾素组、二术解毒汤颗粒剂低、中、高剂量组AFP m RNA、CK19 m RNA、c-Myc m RNA,YAP m RNA、TAZ m RNA的表达显著降低。研究结论:(1)二术解毒汤对于DEN诱导的大鼠肝癌前病变有显著的抑制作用。(2)二术解毒汤可抑制YAP、TAZ的表达,但是否与Hippo通路的激活有关,仍需进一步研究。