莱茵衣藻突变体库构建及光合突变体筛选

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sjzm2009
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藻类是地球上最古老且分布最广泛的低等光合生物群体,其光合作用在全球二氧化碳固定中起着十分重要的作用。随着世界人口的增加,粮食、能源和资源等不足的问题日益突显,提高包括藻类在内的光合生物的光能利用效率,已成为一项日益紧迫的任务。通过科学研究深化对光合作用原理和调控机制的认识,是有效完成这项战略任务的重要前提。本论文以发掘藻类光合作用突变体及重要相关基因为目标,采用质粒随机插入的方法,构建了库容为5000的莱茵衣藻(Chlamydomonasreinhardtii)突变体库;通过分析突变体叶绿素荧光参数的变化,筛选出了一批光合突变体(Fv/Fm显著降低的突变体39个;Y(Ⅱ)显著降低的突变体98个;NPQ显著降低的突变体48个);进一步对野生型与随机挑选的2个突变体的叶绿素荧光动力学进行了比较分析,确认了突变体的PSⅡ最大量子效率(Fv/Fm)、光化学淬灭(qP)、实际光合量子产量Y(Ⅱ)、非光化学淬灭(NPQ)和电子传递速率(ETR)均低于野生型。对突变体Hp的遗传学分析发现,该突变体的第3号染色体上一个预测的与抗氧化胁迫相关基因的3UTR序列被质粒单拷贝插入破坏。对该突变体生长表型的初步分析表明,在正常培养条件下该突变体的生长与野生型没有明显差异,但在逆境胁迫处理下(H2O2处理、缺硫和缺铁)突变体的生长均优于野生型,推测该突变体是一个对氧化胁迫不甚敏感的突变体。这些初步实验结果,为进一步分离突变基因及作用机制的研究,提供了材料,奠定了重要的基础。
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