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目的:揭示circFIP1L1在鼻咽癌(NPC)放疗中的作用,阐明circFIP1L1-miR-1253-SFN信号轴在NPC放射治疗中的分子机制,为逆转NPC放射抗性,提高放疗效果,为临床NPC放射治疗提供有效的靶点。方法:(1)通过高通量测序获得鼻咽癌患者放疗前后血清circRNA(环状RNA)差异表达谱;(2)检测NPC放疗病人血清circFIP1L1的变化:收集放疗前后的鼻咽癌患者血清标本,TRIzol试剂提取总RNA,设计circFIP1L1的背靠背引物,qRT-PCR检测circFIP1L1表达情况;(3)研究放射对NPC细胞circFIP1L1的影响:采用低剂量持续放射法建立放射抗拒鼻咽癌细胞株5-8F-IR,6-10B-IR,qRT-PCR检测circFIP1L1/miR-1253/SFN表达情况;(4)通过RNA免疫共沉淀(RIP)实验分析circFIP1L与miR-1253的关系;(5)研究miR-1253对circFIP1L1和SFN表达的影响:转染miR-1253 mimic及miR-1253 inhibitor到5-8F细胞,RT-PCR检测circFIP1L1和SFN表达变化;(6)研究circFIP1L1影响NPC细胞放射敏感性的分子机制:构建circFIP1L1过表达载体,qRT-PCR检测SFN的表达水平,与空载体对照组比较,观察circFIP1L1对SFN的作用;放射处理后,通过流式细胞术、MTT和集落形成分析鼻咽癌5-8F细胞的细胞周期、凋亡以及放射敏感性变化;结果:(1)获得了鼻咽癌患者放疗前后血清circRNA差异表达谱;(2)鼻咽癌患者放疗后血清circFIP1L1表达升高;(3)应用直线加速器6MV-X射线持续低剂量照射5-8F细胞株,放射总剂量34Gy,筛选放射抗拒细胞株5-8F-IR,细胞增殖测定和流式细胞术验证5-8F-IR为放射抗拒细胞;(4)qRT-PCR检测放射抗拒5-8F-IR,6-10B-IR细胞,与对照组相比,SFN,circFIP1L1均表达降低(P<0.05),而miR-1253表达增加(P<0.05);(5)RIP实验结果显示,circFIP1L1能充当miR-1253海绵的作用;(6)转染miR-1253 mimic及miR-1253inhibitor到5-8F细胞发现,与对照组相比,miR-1253 mimic组SFN表达降低,而miR-1253 inhibitor组表达增加(P<0.05),circFIP1L1表达无明显差异(P>0.05);(7)过表达circFIP1L1后,SFN表达水平上调(P<0.05);(8)过表达circFIP1L1,予以放射处理后,与对照组相比,鼻咽癌5-8F细胞放射抑制率增加,集落形成率和细胞存活分数降低,周期改变,发生G2/M期阻滞,同时凋亡比例增加(P<0.01),细胞放射敏感性增加;(9)转染miR-1253 mimic和miR-1253 inhibitor及其对照组,经放射处理后,与对照组相比,miR-1253 mimic组5-8F细胞集落形成率和细胞存活分数增加,增敏比降低,细胞放射敏感性降低,而miR-1253 inhibitor组细胞则呈相反的结果(P<0.05)。结论:(1)circFIP1L1可能发挥ceRNA的作用,海绵吸附miR-1253调控SFN的表达;(2)过表达circFIP1L1,能够导致鼻咽癌5-8F细胞周期阻滞在G2/M期,增加NPC细胞的放射敏感性。