小分子滥用药物复杂体系的电泳免疫分析方法研究

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药物滥用给人类和社会带来了巨大的危害.建立针对滥用药物的快速、简便、有效的分析方法,特别是适合于同时分析多种滥用药物及其代谢物的方法,无疑对于研究滥用药物在人体内的代谢过程、作用机理,从而解决滥用药物带来的各种问题有着重要的意义.目前滥用药物复杂体系的主要分析方法仍然以色谱学方法(包括GC,HPLC,CE等)为主.这类分析方法的主要优点在于分离过程相对简单,比较容易的能够实现对多种组分的同时分析;但通常需要样品进行前处理或衍生化等步骤.且受到仪器限制,灵敏度不是很高.采用免疫学分析方法对这样的复杂体系进行分析,其主要优点在于特异性较高,样品可以不用或者只需要很简单的前处理,同时灵敏度也较高.但仍然存在诸如抗体的特异性,多组分同时分析以及分析过程有待进一步简化等方面的问题.基于以上,该论文针对性的进行了以下几方面的工作:1.通过从吗啡分子的不同位置修饰制备半抗原,获得了具有不同特异性的多克隆抗体.总结了抗原分子的不同偶联位置对所产生的抗体特异性的影响.并讨论了不同特异性的抗体应用于不同的分析场合的可能性;2.采用具有较高特异性的抗体以及荧光标记方法对待测物进行快速灵敏的电泳免疫分析;从而解决了本组以往建立的吗啡分析体系中存在的交叉反应干扰的问题;3.通过将抗体蛋白共价偶联于聚甲基丙烯酸酯型多孔高分子monolith固定相,建立了在线免疫亲和富集的模型.并对该模型的相关参数如样品浓度,温度,捕获效率及柱容量等方面进行了详细的探讨;4.建立了基于在线的免疫亲和原理的竞争性免疫分析模型.对该模型的定量原则进行了详细的探讨.并对该模型带来的富集效果与传统电泳免疫分析进行了比较.总的来说,该论文的工作较好的解决了传统免疫分析方法中存在的一些问题,并且为最终实现小分子药物复杂体系的在线免疫亲和富集与分离过程相结合奠定了重要基础.
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