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目的:肺癌是所有肿瘤中发病率和致死率最高的恶性肿瘤,严重威胁人类的生命。随着经济的快速发展及环境的污染,肺癌的发病率也在逐年升高。其主要包括小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)和非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)两种不同的病理类型。其中患病人数较多的NSCLC约占肺癌的85%。近年来肺癌的发病率逐年升高,但患者预后并无明显改善。因此寻找肺癌新的治疗靶点尤为重要。RALY是核内不均一核糖核蛋白家族(Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein,hnRNP)的一员,是一种RNA结合蛋白,在m RNA剪接与代谢等方面发挥作用。近些年,越来越多的研究表明RALY在多系统肿瘤中发挥促癌作用,但其在NSCLC中的生物学功能及分子机制仍然未知。本研究旨在探讨RALY在NSCLC中的表达,分析其与NSCLC临床病理学特征的关系及对预后的影响。探索RALY对NSCLC细胞增殖、周期、迁移及侵袭等生物学功能的影响及分子机制。为研究NSCLC的发生、发展机制及靶向治疗提供新靶点。方法:经癌症基因组图谱数据库(The Cancer Genome Atlas,TCGA)下载1020例NSCLC组织样本及108例正常肺组织样本中RALY mRNA表达的数据,进行差异表达分析。应用免疫组化法检测80例NSCLC癌组织及25例癌旁组织中RALY的蛋白表达水平,并分析其与临床病理特征及预后的关系。应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹试验(Western blot)检测人正常支气管上皮细胞16HBE、肺鳞癌细胞SK-MES-1及肺腺癌细胞A549中RALY mRNA和蛋白的表达水平。使用慢病毒稳定转染,沉默SK-MES-1和A549细胞中的RALY,对处理后的细胞行CCK8实验、细胞划痕实验、Transwell侵袭实验及流式细胞术,并检测细胞周期相关指标(c-Myc,Cyclin D1,CDK 4,P27)、细胞转移相关指标(MMP9,Rho A,Rho B,Rho C)及上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关指标(N-cadherin,E-cadherin,β-catenin)表达差异。使用慢病毒转染,对沉默RALY的A549稳转细胞株重新引入RALY序列以进行挽救实验,观察挽救后的A549细胞增殖、迁移及侵袭能力变化。结果:检索TCGA数据库结果显示,与正常肺组织相比,RALY mRNA在NSCLC患者癌组织中高表达。免疫组化结果显示,与NSCLC患者的癌旁组织相比,RALY蛋白在癌组织中高表达,其表达水平与淋巴结转移(P=0.007)相关。单因素分析结果表明淋巴结转移阳性(P=0.029)、临床分期Ⅲ期(P=0.001)及RALY高表达(P=0.047)是影响NSCLC总生存的不良预后因素;多因素分析结果表明临床分期(P=0.008)是影响NSCLC总生存的独立预后因素。生存分析结果显示RALY高表达的患者预后较差(P=0.042)。与正常支气管上皮细胞16HBE相比,肺鳞癌细胞SK-MES-1和肺腺癌细胞A549中RALY m RNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05)。与阴性对照组相比,沉默RALY抑制SK-MES-1和A549细胞的增殖、迁移及侵袭能力,参与调节EMT进程,使细胞阻滞在G1期,且RALY的重新引入挽救了A549细胞的增殖、迁移及侵袭等生物学表型。沉默RALY可下调c-Myc、Cyclin D1、CDK4、MMP9、Rho A、Rho C、N-cadherin和β-catenin的表达水平,上调了Rho B、P27及E-cadherin的表达水平。结论:RALY在NSCLC中高表达,与淋巴结转移相关,其高表达的NSCLC患者预后差;RALY促进NSCLC细胞的增殖、迁移及侵袭能力,参与调节细胞周期及EMT过程,影响相关下游指标表达水平。