蛹虫草的家蚕人工培育及其ITS DNA序列分析

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蛹虫草菌[Cordyceps militaris,(L.ex Fr.)Link.]也称北冬虫夏草、北虫草,其药用价值与驰名中外的冬虫夏草(Cordyceps sinensis)相似,为我国名贵的药用真菌。因虫草野生资源不断减少,致使虫草价格不断上涨,在国际市场上有很好的发展前景。目前,在国内外,对蛹虫草生物学特性、人工培育和应用价值等都有所研究,但在感染家蚕幼虫并成功培养出子实体的报道中,方法各异,子实体产率和稳定性不高,为此,我们作了如下研究:1.人工培养基上的试栽试验:首先筛选出了适合菌丝生长的优化培养基为加富PDA培养基。再通过在人工培养基上试栽试验,筛选出了适合其生长的较优条件和生长较好的菌株。2.蛹虫草感染家蚕的试验:通过对五龄家蚕幼虫的感染试验,筛选出了较优方法为表面消毒浸染法和孢子悬液注射法。同时对家蚕蛹进行了感染试验,得出感染效果较佳的条件。通过此试验筛选出了对家蚕幼虫和蛹感染效果较好的菌株为04718菌株。3.退化菌株复壮试验及菌株的ITS DNA分析:蛹虫草在试栽过程中经常会出现菌种退化的现象,针对此现象我们一方面作了部分菌种复壮试验,得出较好的方法为虫体回接法;另一方面采用核酸序列分析方法,扩增并测序了16个供试菌株的ITS区段,系统分析表明,复壮菌株与退化菌株在分子水平上发生了较大改变,复壮之后与未发生退化菌株具有较大相似性。并通过系统树分析了各供试株之间的亲缘关系和系统演化。
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