[目的]　　 研究促炎物质对单核细胞IL-37及Smads信号通路分子表达的影响，对IL-37的抗炎作用可能机制进行初步探讨。　　 [方法]　　 1.分离获取健康人外周血单个核细胞(PBMCs)，分别用TNF-α和LPS作用PBMCs进行促炎物质的刺激实验，以未予促炎物质刺激的PBMCs为对照组，分别用TNF-α和LPS作用PBMCs0.5 h、1h、4h、8h，然后分别用实时荧光定量PCR进行检测IL-37及Smads和NF-κB信号通路分子的表达水平。另外，分别用1 ng/ml～100 ng/ml等不同浓度的TNF-α和0.01μg/ml～10μg/ml等不同浓度的LPS刺激PBMCs，用实时荧光定量PCR进行检测促炎物质不同浓度作用PBMCs后，其IL-37及Smads和NF-κB信号通路分子表达水平的变化。　　 2.用佛波酯(PMA)诱导单核细胞THP-1分化为巨噬样细胞，以之为靶细胞进行促炎物质的相关刺激实验，以未予促炎物质促炎物质刺激的细胞为对照组，分别用TNF-α和LPS作用THP-16h、12h、24 h，然后分别用实时荧光定量PCR进行检测IL-37表达及Smads和NF-κB信号通路分子的表达水平。另外，分别用1 ng/ml～100 ng/ml等不同浓度的TNF-α和0.01μg/ml～10μg/ml等不同浓度的LPS刺激THP-1，用实时荧光定量PCR检测IL-37及Smads和NF-κB信号通路分子表达水平的变化。　　 [结果]　　 1.TNF-α、LPS对PBMCs IL-37表达的影响。分别用促炎物质TNF-α、LPS刺激PBMCs后，实时荧光定量PCR检测结果显示，PBMCs经30 ng/ml TNF-α作用0.5 h、1h、4h、8h等不同时间后，IL-37 mRNA的表达水平逐渐升高。当TNF-α刺激PBMCs4 h后，其IL-37 mRNA的表达水平与对照组比较具有显著的差异(P＜0.05）。PBMCs经1μg/ml LPS作用0.5 h、1h、4h、8h等不同时间后，IL-37 mRNA呈上升表达。当LPS刺激PBMCs1 h时，其IL-37 mRNA的表达水平与对照组比较具有显著差异(P＜0.05）;作用4h、8h时，其IL-37 mRNA的表达水平与对照组比较，则具有非常显著的差异(P＜0.01），并随着刺激时间的延长，IL-37 mRNA的水平呈继续上升表达。不同浓度促炎物质刺激PBMCs后的检测结果显示，IL-37的表达水平随着TNF-α和LPS作用浓度的升高，IL-37的表达水平逐渐上升。当TNF-α浓度为30 ng/ml时，IL-37表达至最高水平，高于该作用浓度后，IL-37的表达水平未见明显升高;当LPS浓度为1μg/ml时，IL-37表达至最高水平，随着LPS作用浓度的继续增加，IL-37的表达水平则未见明显升高。　　 2.LPS对PBMCs Smads信号通路分子表达的影响。当用1μg/ml LPS作用PBMCs0.5 h、1h、4h、8h等不同时间后，实时荧光定量PCR结果显示，当LPS分别作用PBMCs0.5 h、1h、4h时，Smad2的表达呈上升趋势，而作用8h时则有所下降;Smad3的表达水平也随着作用时间的增高而逐渐升高，作用4h时，其表达水平与对照组相比较才具有显著差异(P＜0.05); Smad7的表达则在LPS作用PBMCs1 h时就显著升高，与对照组相比较具有显著差异(P＜0.05），当LPS作用分别上升至4h、8h时，Smad7表达水平的升高与对照组相比较具有非常显著升高(P＜0.01）。　　 3.LPS对PBMCs NF-κB信号通路分子表达的影响。当用LPS(1μg/ml)刺激PBMCs0.5 h、1h、4h、8h等不同时间，实时荧光定量PCR结果显示，LPS作用PBMCs8 h时，NF-κB P65表达水平升高与对照组相比较具有显著差异(P＜0.05);在LPS作用PBMCs0.5 h至8h时，IκBα的水平均呈明显升高，与对照组相比较都具有显著的差异(P＜0.05）;当LPS作用PBMCs0.5 h～1 h时，IKKβ的表达水平与对照相比较均具有显著的差异(P＜0.05)，当作用4h时，则具有非常显著的差异(P＜0.01），当8h时其表达水平有所下降，但与对照组相比较仍具有显著差异(P＜0.05）。而LPS作用PBMCs后，IKKα表达尽管有所升高，但与对照组相比较，无统计学意义(P＞0.05)。　　 4.TNF-α、LPS对THP-1 IL-37表达的影响。THP-1经PMA诱导分化成巨噬细胞后，分别用TNF-α和LPS进行刺激实验。实时荧光定量PCR结果显示，当用30 ng/ml TNF-α作用THP-1后，IL-37 mRNA的表达水平逐渐升高，至作用12h时，其IL-37 mRNA的表达水平与对照组相比较，具有非常显著的差异(P＜0.01)，作用24 h时达最高峰。另外，当用不同浓度的TNF-α处理THP-1细胞的检测结果显示，当TNF-α浓度为30 ng/ml时，IL-37表达水平达到最高，之后，IL-37的表达水平并没有随着TNF-α作用浓度的继续增高。当用1μg/ml LPS刺激THP-1后，IL-37 mRNA水平呈上升表达，作用12h、24 h与对照组相比具有显著差异(P＜0.05)。当用不同浓度的LPS处THP-1理细胞，结果显示，当LPS浓度为1μg/ml时，IL-37表达至最高水平，然后IL-37的表达水平并没有随着LPS作用浓度的继续增高。　　 5.TNF-α对THP-1 Smads信号通路分子表达的影响。THP-1经PMA诱导分化成巨噬细胞后，用TNF-α进行刺激实验。实时荧光定量PCR结果显示，当用TNF-α(30 ng/ml)刺激6h、12h、24 h等不同时间后，只有刺激24 h时Smad2、Smad3 mRNA的表达水平明显升高，与对照组相比较具有显著差异(P＜0.05）。而Smad7的表达水平则在TNF-α作用THP-112 h时就呈显著升高(P＜0.05），当作用24 h时，Smad7的mRNA表达水平与对照组相比较则具有非常显著差异(P＜0.01)。　　 6.TNF-α对THP-1 NF-κ B信号通路分子表达的影响。THP-1经PMA诱导分化成巨噬细胞后，用TNF-α进行刺激实验。实时荧光定量PCR结果显示，经TNF-α(30 ng/ml)刺激THP-16h、12h、24 h等不同时间后，NF-κB P65表达水平逐渐升高，但在作用24 h时，NF-κ B P65的表达水平与对照组相比较具有显著差异（P＜0.05）。IκBα的表达水平在TNF-α作用THP-1后有所升高，至作用24 h时，其表达水平的升高与对照组相比较具有非常显著的差异(P＜0.01)。IKKα和IKKβ的表达水平在TNF-α作用THP-1后也呈上升表达，但只有在作用24 h时，二者的表达水平与对照组相比较才具有显著的差异(P＜0.05）。　　 [结论]　　 TNF-α和LPS等促炎物质能够上调单核细胞IL-37，同时Smad2、Smad3、Smad7等Smads信号通路分子也呈上调表达且与IL-37上调表达趋势基本一致，提示IL-37可能通过Smads信号通路发挥抗炎作用，将为进一步研究IL-37的抗炎作用机制提供一定的实验依据。