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前言 滑面内质网中含有丰富的细胞色素，主要为细胞色素P450（CYP450）和细胞色素b5，它们在外源脂溶性化合物的生物转化和部分内源性基质代谢（如胆汁酸形成、胆色素代谢、类固醇物质合成）过程中起重要作用。CYP450是50年代中期Williams和Klingeberg发现、60年代初木村（Omura）和佐藤（Sato）验证的一类b族细胞色素，由于还原型细胞色素与一氧化碳结合后在光谱的450nm处具有最高吸收峰，因而命名为CYP450以别与其它b族细胞色素，P是英文Peak（高峰）的缩写。现已明确CYP450实际上是一类具有不同分子量、不同生化和免疫学特征以及不同催化能力的血红素蛋白的总称，它们所主导的生物转化过程是一个复杂的连锁酶促反应过程，CYP450与滑面内质网的其它成员如NADPH-CYP450还原酶、细胞色素b5、NADH-细胞色素b5还原酶、磷脂等组成混合功能氧化酶（简称MFO）系统，此外尚须供应足量的NADPH和分子氧。CYP450在氧化活动和底物结合中的作用决定其在MFO系统中起决定性作用。 花生四烯酸一旦从膜磷脂中释放出来可被三个主要的酶系统氧化：环氧化酶、脂氧化酶和依赖于CYP450的单氧化酶途径。花生四烯酸代谢的三个酶在脑组织（包括下丘脑）、肝、肾、肺和其它一些组织中表达。这三个途径分别导致生成PGs、LTs、环氧基和羟基四烯酸。抑制花生四烯酸代谢的任何一个酶能使其更容易从其它途径代谢。环氧化酶代谢途径导致发热，这一点已被大量的研究结果所证实。一些学者报导脂氧化酶代谢途径不参与体温调节，依赖于CYP450的单氧化酶代谢途径有参与解热和控制发热上限的作用。 细胞色素b。能与CYP450紧密结合形成1：1的蛋白质复合物，诱导后者自旋状态由低到高的改变，并增加其与底物的亲和力，从而增加其代谢活性。而且CYP450含量与细胞色素b。含量的比值非常重要，CYP450的代谢活性随着比值的改变而改变。 CYP450在体温调节中的作用是其氧化代谢作用的一个体现。细胞色素b。影响CYP450在体温调节中的作用也是因为其在CYP450代谢过程中有重要作用。本项研究为了明确CYP450和细胞色素b。在体温调节中的作用，向大鼠腹腔注射致热源及解热药，观察大鼠体温变化的同时其CYP450和细胞色素b。含量的变化。 材料与方法 （一）实验动物 实验动物为40只雌性Wistar大鼠，体重200－2209。其被集体饲养在光线＼温度和湿度都受控制的密闭小室内。动物饲养环境为12八2小时明暗周期N800－2000为光照入室温为18－25℃，相对湿度为K0土2)％。可自由得到食物和水，并且在给处理因素前至少适应环境二周。 （二）给药方法 所用药物均经腹腔注射。对照组、LPS组、丁香酚组给药全部在上午0900施行，LPS／丁香酚组腹腔注射LPS是在上午0900施行而腹腔注射丁香酚是在上午1200施行。 （三）测温方法 用北京师范大学司南仪器厂生产的数字温度计测量大鼠的体温，将传感器插人直肠6cm。0900－1900每小时测量一次。体温值用平均值。标准差表示。 ·2· （四）测量肝微粒体CYP45D和细胞色素b。含量的方法 用改进的Omura和Sato方法测量注射后24 ／J＼时的肝微粒体CYP450和细胞色素b。的含量。测量CYP450含量时样品管含匀浆介质K．SInl入连二亚硫酸钠门．Zllil入微粒体N．3Inl入快速充人CO门0秒)并混匀，对照管含匀浆介质N．SInlX连二亚硫酸钠N．ZM人微粒体N．3M)并混匀。读出忙0一及490一处的光密度值。测量细胞色素b。含量时样品管含匀浆介质K．sndX连二亚硫酸钠①．ZInl人微粒体N．3Inl)并混匀，对照管含匀浆介质N．7llil厂微粒体门．3」)并混匀。读出423urn及500urn处的光密度值。然后用以下公式计算CYP450和细胞色素b。的含量值。其中0．09和0．171分别为CYP450和b。的消光系数，稀释倍数＝7．0川．3＝23，蛋白量为样品蛋白浓度其用双缩尿法测量。 、。－。、，、AA（450－490）urn、。。。、。， P450（nmoVmg）＝千十于六云己产 X稀释倍数 一”一 一口”0＊＊玉＊蛋＊景·”卜。·＊一 AA（423、500 ） urn、。一一山， b。（nmol／mg）＝千十于二云六于X稀释惜数 一〕、一一一一一一一一口／ 0 091蛋白量’”卜刁”＊一 （五）实验仪器与试剂 高速离心机（型号：DuPont So。ISuPer T。；，转头号：SL－50T）＼超速离心 机(型号：OTD 55B SoNIUltracentriDge DuPont，转头号：T647．5厂电动组织匀浆器（Heidolph DIAX900，Germa－ny）、超声波细胞粉碎机（UP 50H UltrachallProcessor，Germany）。磁力搅拌机(DSHK－4型，温州市医疗电器厂入UV－260分光光度计（日本岛津瞩himadzu）公司厂PH计(INOLA PHChVEtow’r’w，armanv入数字温度计（传感器为大鼠型，北京师范大学司南仅器厂人电子天平OD 200－3，沈阳龙腾电子称量仪器有限公司）、冰柜（一70℃）、冰柜（一20℃）。 LPS＊多糖，大肠杆菌?