基于超支化聚合物的糖基化表面的构建及其对细胞迁移的影响

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细胞迁移是一个相互协调的多级化过程,与胚胎形成和发育、组织修复与再生、伤口愈合等密切相关,在生物体的生命活动中扮演重要角色。糖类是生物体的主要组成物质,同时也是传递生物信息的重要分子物质。制备糖基化生物界面,利用糖-蛋白质特异性识别的原理来调控细胞迁移是一种有效途径。本文首先合成了半乳糖修饰的超支化聚酰胺胺(LA-HPMA),通过多巴胺沉积的方法在玻璃基底表面接枝了不同密度的LA-HPMA/聚乙二醇(PEG)互补密度的均匀表面。利用椭圆偏振光谱、石英晶体微天平(QCM-d)和X射线光电子能谱(XPS)对两种分子的接枝量和接枝比例进行了表征。随着LA-HPMA密度的增加,人肝癌细胞(HepG2)的粘附数量和铺展面积相应增加,同时迁移速率(最高为12.65 μm/h)相对于细胞培养盘(TCPS)表面(3.29 μm/h)提高了3倍。而对于小鼠成纤维细胞(NIH3T3)数量和铺展面积随LA-HPMA密度的增加有缓慢递增趋势,但是并无显著性差异,迁移速率相对TCPS表面也没有明显提高。导致这种粘附性差异的原因是半乳糖基能与HepG2表达的去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)特异性识别,而NIH3T3不表达这种受体。为了研究不同半乳糖密度对细胞定向迁移的影响,采用密度梯度法在玻璃基底表面制备了8 mm长度的LA-HPMA/PEG互补密度梯度,采用XPS测量N/C比对梯度进行了表征。沿着梯度正方向,N/C比例增加,即LA-HPMA密度增加,PEG相应减小。在梯度中间位置(4 am处)有83.7%的HepG2细胞向梯度正方向迁移,迁移速度最快在7 mm,是TCPS表面的2.8倍,而NIH3T3细胞迁移没有特定的方向性,迁移速率也与TCPS相同。半乳糖基梯度表面为HepG2的定向迁移提供了牵引,而PEG也起到了协同作用。本文利用糖与细胞表面蛋白质特异性相互作用的原理实现了糖基密度梯度表面对细胞的选择性定向迁移。
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