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背景:胰腺癌作为恶性程度最高的消化道肿瘤之一,早期诊断极其困难,并且缺乏有效的治疗手段。目前胰腺癌的发病率和死亡率近年来呈明显的上升趋势。尽管存在较多的治疗方式,但是外科根治性切除手术依然是首选且能够治愈胰腺癌的唯一方法。然而能够行根治性切除的胰腺癌患者仅占20%左右,且手术患者约三分之一在术后三个月内出现复发和转移。目前为止,胰腺癌的中位生存时间只有6个月左右,胰腺癌治疗效果不容乐观。因此,探索胰腺癌早期诊断方法,预后指标,并开发有效的治疗策略迫在眉睫。胸苷激酶1(TK1)是一类周期依赖的蛋白酶体,通过嘧啶合成的补救途径参与DNA的合成和修复。因此TK1是机体细胞增殖和周期调控的重要组成部分。众所周知,肿瘤的发生和发展是一类复杂的生物学进程,尽管确切机制未知,但是异常的细胞增殖以及细胞周期改变被认为是肿瘤形成的重要事件之一。目前为止,众多文献报道TK1可作为很多癌症的预测生物学指标,例如乳腺癌、肾癌、肺癌等等,但是TK1在胰腺癌中的表达水平以及扮演的角色尚未可知。目的:检测胰腺癌样本中TK1表达水平,分析其表达水平与胰腺癌患者临床病理资料的相关性。研究TK1在胰腺癌细胞株中的表达,探讨TK1对胰腺癌细胞增殖、侵袭、迁移功能的影响及相关分子机制。探索TK1促胰腺癌进展的上游调节机制,为胰腺癌的治疗提供新的靶点。方法:1、通过免疫组化染色检测胰腺癌样本中TK1表达水平;并分析TK1表达与临床病理资料的相关性以及与不良预后的相关性。通过实时定量PCR及Western Blot检测胰腺癌细胞株中TK1的表达量;利用小干扰RNA转染构建TK1干扰细胞株;通过CCK-8实验、克隆形成实验、裸鼠皮下成瘤模型等实验验证TK1对胰腺癌细胞增殖功能的影响;通过划痕实验,Transwell实验观察TK1对胰腺癌细胞迁移、侵袭的影响。在细胞株中干扰TK1的基础上,通过流式分别对干扰细胞株的凋亡水平以及周期情况进行检测,并对TK1促进胰腺癌细胞增殖的机制进行探索。通过Ch IP实验验证TK1受上游转录因子E2F1的直接调控。结果:1、通过TCGA数据分析以及免疫组化分析结果表明,与癌旁组织相比,TK1在胰腺癌组织中异常的高表达,并且TK1的高表达与Ki-67表达成明显正相关;癌中高表达的TK1与胰腺癌患者不良预后相关,同时是胰腺癌患者不良预后的独立危险因素。在胰腺癌细胞株中干扰TK1能明显抑制胰腺癌细胞的增殖能力。干扰TK1能上调p21表达以将细胞周期阻滞S期,并进一步抑制胰腺癌细胞增殖。E2F-1能够识别TK1的启动子区域,并与之结合。直接正向调控TK1的表达水平。结论:TK1可能参与胰腺癌的生物学进展,并在未来的研究中可作为一个有前景的治疗新靶点。