荔枝果皮多酚类成分及抗氧化活性研究

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目的:荔枝食用后会产生大量废弃的果皮,目前,对于荔枝果皮的化学成分和药理作用研究甚少。为了阐明荔枝果皮的物质基础和抗氧化生物活性,本研究采用80%乙醇对新鲜荔枝果皮进行提取,跟踪分离其抗氧化活性部位,对活性部位的化学成分进行分离和结构鉴定,并研究分离得到单体化合物的抗氧化活性。结果将为荔枝果皮在功能食品和医药领域的开发利用提供理论依据,为进一步促进荔枝果皮的综合利用及产业链的延伸提供技术支撑。  方法:(1)荔枝果皮的提取和抗氧化活性部位的确定:新鲜荔枝果皮用80%乙醇室温浸提2次,每次7天,过滤,合并滤液,减压浓缩得到荔枝果皮提取物,提取物经Sephadex LH-20凝胶柱层析及硅胶薄层板跟踪划分成不同部位,福林酚比色法测定不同部位的多酚含量,并运用DPPH法和ABTS法测定其不同部位的抗氧化活性。  (2)抗氧化活性部位化合物的分离:运用Sephadex LH-20,C18,Toyopearl Butly-650C,MCI gel CHP20P,Toyopearl WH-40F柱层析和半制备高效液相色谱制备等分离手段,对其抗氧化活性部位进行系统分离,利用一维和二维核磁共振谱、质谱等多种波谱数据分析鉴定化合物结构。  (3)分离得到的单体化合物抗氧化活性研究:运用DPPH法和ABTS法测定单体化合物的抗氧化活性。  结果:(1)荔枝果皮多酚类成分的提取率达到9.5%(浸膏),提取物经Sephadex LH-20柱层析划分为5个部位(Fr.1到Fr.5),其中Fr.1主要为单糖类成分,没有作进一步的研究。通过抗氧化活性检测,活性部位为Fr.3、Fr.4和Fr.5。  (2)从荔枝果皮中分离鉴定了22个化合物,主要为多酚类化合物,包括黄烷醇类、黄酮及黄酮苷类、酚酸及酚苷类,木脂素类化合物。其中黄烷醇类化合物6个:litchin A(J1)、(+)儿茶素[(+)-catechin,J2]、(-)表儿茶素[(-)-epicatechin,J3]、原花青素A2(procyanidin A2,J4)、原花青素B2(procyanidin B2,J5)、Cinnamtannin B-1(J6);黄酮及黄酮苷类化合物9个:槲皮素(quercetin,J7)、柯伊利叶素(chrysoeriol,J8)、槲皮素-3-O-β-D-鼠李糖苷(quercetin-3-O-β-D-rhamnoside,J9)、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(kaempferol-3-O-β-D-glucoside,J10)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(quercetin3-O-β-D-glucoside,J11)、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷(luteolin7-O-β-D-glucoside,J12)、槲皮素-3-O-β-D-芸香糖苷(quercetin3-O-β-D-rutinoside,J13)、异鼠李素-3-O-刺槐二糖苷(isorhamnetin-3-O-robinobioside,J14)、quercetin-3-O-(α-rha[1→2],α-rha[1→6])-β-glucoside(J15);木脂素类化合物2个:异落叶松脂素-9-O-β-D-木糖苷(isolariciresinol-9-O-β-D-xyloside,J16)、5-甲氧基异落叶松脂素-9-O-β-D-木糖苷[(+)-5-metho xyisol ariciresinol-9-O-β-D-xyloside,J17)]、酚酸及酚苷类化合物5个:香草酸(vanillic acid,J18)、原儿茶酸(3,4-dihydroxybenzoic acid,J19)、它桥糖苷(tachioside,J20)、异它桥糖苷(isotachioside,J21)、3,3,4,4-四羟基联苯(3,3,4,4-tetrahydroxybiphenyl, J22)。  (3)单体化合物中化合物J3、J5、J6、J19的抗氧化活性较强,强于Vc;其次是化合物J1、J4的抗氧化活性基本与Vc相当;化合物J10、J16的抗氧化活性较弱,弱于Vc。  结论:通过对荔枝果皮的抗氧化活性筛选研究,确定了采用SephadexLH-20凝胶纯化后的抗氧化活性部位为Fr.3、Fr.4和Fr.5,并且各部位的总酚含量与抗氧化能力存在着量效关系。从荔枝果皮中共分离并鉴定化合物22个,在化合物中,化合物J1为新化合物,其他除J3、J4、J5、J6、J13化合物外,均为首次从荔枝果皮中分离得到。并且分离得到的其中8个单体化合物均具有较好的抗氧化活性。
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