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芥子是十字花科植物芥菜的成熟种子,富含硫代葡萄糖苷(硫苷),酶解后产生具有杀根结线虫活性的异硫氰酸酯类物质。本论文采用液质联用技术建立了一种定性、定量分析硫苷和烯丙基异硫氰酸酯的方法。并以海南产芥子为原料,研究其硫苷提取、树脂分离和酶解条件。利用制备色谱分离技术纯化异硫氰酸酯类化学成分,经HRMS、EA、IR和NMR确定了其化学结构。主要研究结果如下：1.建立了LC-ESI-MS定量分析硫苷的方法采用C18柱,流动相(5mM乙酸铵+0.1%甲酸)、甲醇梯度洗脱。ESI负离子模式下,硫苷线性范围0.5-50mg/L,相关系数R≥0.998,检出限0.5-1.0ng。2.应用ESI-MS/MS确定了硫苷串联质谱裂解规律ESI负离子模式下,硫苷串联质谱裂解规律：一条途径是母离子直接中性丢失RCN和RCNS;一条途径是氢重排后失去RCNO,继而脱去一分子H2S或S03；另一途径是母离子发生氢重排,失去C6H10O8S或C6H12O5S中性碎片。二级质谱中能观察到m/z195,241,259,275,291和R-C(SH)=N-O或R=C=N-OSO3的特征离子,对于鉴别硫苷具有重要意义。3.建立了LC-APCI-MS定量分析烯丙基异硫氰酸酯的方法采用C18柱,0.05%甲酸水溶液/甲醇(3/7,V/V)作流动相,APCI正离子模式下,线性范围0.1-100mg／L,相关系数R=0.998,检出限0.1ng。4.通过单因素实验研究了硫苷提取条件,借助LC-ESI-MS定量分析烯丙基硫苷(Sinigrin)得到了优化的提取条件：70%甲醇水溶液,料液比1：10,水浴温度80℃,提取1.5h。5.通过单因素实验研究葡聚糖凝胶树脂DEAE Sephadex A-25纯化硫苷,利用LC-ESI-MS定量分析Sinigrin得到了优化的分离条件：2g树脂上样体积35mL、45℃吸附20min、35mL0.1mol/L K2SO4洗脱。6.通过正交实验,结合LC-APCI-MS定量分析烯丙基异硫氰酸酯,确定酶解条件,pH=7,40℃,酶用量0.5mg,反应40min为最佳条件。7.优化条件下,提取硫苷、树脂纯化、制备色谱分离后应用ESI-MS/MS技术,结合硫苷串联质谱裂解规律鉴别,将未知硫苷馏分酶解反应,分离纯化后经HRMS、EA、IR和NMR分析,共鉴定出甲代烯丙基异硫氰酸酯(Ⅰ)、3-氰基苯基异硫氰酸酯(Ⅱ)、4-氰基苯基异硫氰酸酯(Ⅲ)、3.(甲硫基)苯基异硫氰酸酯(Ⅳ)和苯乙基异硫氰酸酯(Ⅴ)5个化合物。其中化合物V为芥子中已报道化合物,化合物Ⅰ-Ⅳ首次从其酶解产物中分离得到。上述结果表明：该法简单可靠,可有效提取分离鉴定硫苷及其酶解产物异硫氰酸酯类化合物,为进一步的研究、开发利用此类物质奠定基础。