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目的： 如何检出D／BMD携带者是D／BMD遗传咨询上的一个难点和热点，多年来一直没有一个理想的切实可行的方法。本实验建立了在多重PCR诊断基因缺失型D／BMD先证者的基础上，应用FISH检查其女性亲属是否为携带者的方法，并对染色体特异性重复序列探针的扩增进行了尝试。 方法： 1．我们首先通过查阅文献，确定采用粘粒作为DMD特异性探针的载体，并承蒙荷兰莱顿Leiden大学人类遗传学系Dr．E．Bakker和鹿特丹Erasmus大学Dr．Jan Van Hemel的慷慨相助，我们获得了覆盖dystrophin基因外显子44—47区域的8个粘粒以及X染色体着丝粒探针XB12。我们采用碱裂解法提取粘粒DNA，采用DOP—PCR大量扩增染色体特异性重复序列探针，采用缺口翻译法将上述探针进行地高辛和生物素荧光标记并改良了该方法的反应终止体系。 2．自1997年起，我们采用多重PCR方法先后对19名在我遗传咨询门诊就诊的D／BMD先证者进行基因诊断，并对5例男性胎儿进行产前诊断，从中我们筛选出了两名有dystrophin基因外显子46缺失的先证者，其中一例有阳性家族史，另一名来自一个散发家系。 3．采用双色FISH对上述两例D／BMD先证者的女性亲属进行携带者的检查，在探针选择上，除了采用相应于dystrophin基因外显子46的风险DMD探针1919之外，还选择了距离探针1919最近而又完全位于1919区域之外的DMD探针1906以及XB12作为对照：在病例设计上采用正常男性和正常女性作为对照。每份标本在镜下观察所有的染色体中期分裂相并随机观察200个间期细胞核，在正常对照组的杂交错误率小于5％的前提下，计算各个病例1919和1906探针的杂交率并将其分别与正常对照组的杂交率进行相对数分析。 结果： 1．FISH结果显示，DMD特异性探针和经DOP—PCR扩增2～3轮后的染色体特异性重复序列探针的杂交信号清晰、明亮，背景荧光少，说明我们对粘粒DNA的提取、DOP—PCR的扩增以及对上述探针的荧光标记是成功的。