ZmWOX9和ZmWOX13在玉米发育中的生物学功能初探

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玉米是我国重要的粮食及经济作物,提高玉米的产量对于保证国家粮食安全具有非常重要的作用。高等植物中,分生组织的发育对地上部分的形态建成具有非常重要的作用。WOX(WUSCHEL-related homeobox)基因家族在植物发育的各个时期都发挥着重要作用。相关研究在其它物种中报道较多,但玉米中关于WOX基因功能的研究报道还很少。本课题围绕玉米WOX9,WOX13两个亚家族展开,对其进行了基因进化分析和表达分析,并利用CRISPR/Cas9技术进行基因敲除得到相关基因成员的多突变体,以鉴定其生物学功能。本研究主要得到了以下结果:1.对玉米、高粱、拟南芥和水稻中的WOX9,WOX13两个亚家族蛋白序列进行了系统发育树分析和保守结构域分析。发现不同物种的WOX9,WOX13两个亚家族成员的蛋白均具有典型的同源异型结构域,暗示这两个亚家族在进化上极有可能来源于共同的祖先,并在随后的进化过程中逐渐分化为两个亚家族。2.表达分析发现Zm WOX9A和Zm WOX9C的表达模式非常类似:在玉米雌穗中的小穗对分生组织(Spikelet-Pair Meristem,SPM)的起始部位、小穗分生组织(Spikelet Meristem,SM)的两侧及小花分生组织(Floral Meristem,FM)部位特异表达,暗示了Zm WOX9亚家族可能在雌穗分生组织发育中发挥相关作用。对Zm WOX13A和Zm WOX13B的表达分析发现,这两个基因均特异表达在茎尖分生组织(Shoot Apical Meristem,SAM)向雄穗转换时期的分生组织及雌穗中的SPM起始部位,推测Zm WOX13亚家族在茎顶端分生组织向生殖转换和雌穗分生组织的起始过程中可能发挥作用。3.利用CRISPR/Cas9技术对Zm WOX9,Zm WOX13两个亚家族的5个WOX基因进行编辑,成功获得了功能缺失多突变体。并对zmwox13a,b双突变体植株的农艺性状和穗发育表型进行考察,发现zmwox13a,b双突变体的小花密度较野生型明显降低、雌穗发育初期SPM发育受到抑制并发育明显滞后且成熟果穗的穗粗和穗行数明显降低,表明Zm WOX13A和Zm WOX13B这两个基因对SPM发育起始可能起到重要作用。
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