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目的：用放射配体结合分析法(RLBA)检测内毒素(LPS)刺激下人肺微血管内皮细胞(HPMEC)血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)一型受体(AT1-R)功能。
方法：浓度为100ng/ml的LPS刺激体外培养接种于24孔板的HPMEC8小时；0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2、4.0fmol/ml八个不同浓度的放射性配体<125>Ⅰ-AngⅡ分别加入不同的板孔中，终体积为0.5ml，每个浓度设3个平行孔；孵育2小时，洗脱三次后γ计数仪计数，测定AT1-R的总结合；另设上述平行孔，每孔加入5μgAngⅡ用于非特异性结合测量；由于总放射计数(TL)=总结合计数(TB)+游离放射配体计数(F)，总结合计数=特异性结合计数(SB)+非特异性结合计数(NSB)，由此可得到游离放射配体计数与特异性结合计数；绘制AT1-R饱和曲线，特异性结合曲线，游离结合曲线与Scatchart曲线。
结果：随放射性配体<125>Ⅰ-AngⅡ加入量的增加，非特异性结合也相应逐渐增加，且由直线相关与回归分析得到非特异性结合增加与加入<125>Ⅰ-AngⅡ剂量呈直线关系(R<2>=0.9929)；Scatchart作图得B/F与B呈直线关系，其相关系数R<2>=0.9514，反应亲和力的Kd值为109pmol/5×10<5>细胞，从Scatchart曲线与X轴截距得到AT1-R的最大结合位点Bmax为29pmol/5×10<5>细胞；AT1-R饱和曲线分为两段，前段斜率较大，后端较为平坦，在<125>Ⅰ-Ang Ⅱ在1600pmol/5×10<5>细胞到2000pmol/5×10<5>细胞之间TB的增加与NBS增加基本相当，特异性结合随<125>Ⅰ-AngⅡ的增加变化不明显，故能使AT1-R饱和的<125>Ⅰ-AngⅡ剂量为1600pmol/5×10<5>细胞。
结论:LPS刺激下HPMEC的AT1-R与AngⅡ结合属于高亲和力结合，RLBA能得到AT1-R的Bmax，可用于LPS刺激下HPMEC的AT1-R功能研究。