外泌体,一种直径约30-100 nm的双层膜囊泡状结构小体,可由机体内多种细胞主动分泌产生,广泛分布于各种体液中。由于外泌体的特殊结构和功能,使得它具有许多潜在的应用价值,作为新一代的生物标志物和治疗载体,将在基础研究,临床诊断治疗以及药物输送中将会发挥巨大的优势。因此开展建立高选择性的肿瘤特异性外泌体分离技术具有重要意义。已有的离心和超滤等方法选择性差,而基于生物蛋白抗体的技术,存在造价高和稳定性差的缺点。分子印迹技术是20世纪末出现的一种高选择性分离技术,其基本思想是源于人们对抗体-抗原专一性的认识,利用具有分子识别能力的聚合物材料——分子印迹聚合物来分离、筛选、纯化化合物的一种仿生技术。分子印迹聚合物有着卓越的分子识别性能和稳定性,在许多方面得到了广泛的应用,但是将分子印迹技术应用于外泌体分离和检测还未有相关报道。本论文主要开展了以下内容的研究工作:(1)将适配体技术与分子印迹技术结合,合成了蛋白分子印迹材料,并对材料的吸附量,吸附动力学,吸附等温线以及吸附选择性性能进行了评价,结果表明结合适配体核酸扩增的分子印迹的吸附动力学,吸附等温线不同于普通印迹材料,展现了优异的结合与识别性能。(2)将适配体以及核酸扩增技术与分子印迹技术结合,研究制备外泌体分子印迹材料,可以实现外泌体的识别和俘获。(3)将该新型材料引入微流控芯片,应用于癌症病人血样中癌细胞来源外泌体的捕获,并通过后续对肿瘤细胞来源外泌体的内含突变核酸片段的检测,为构建基于外泌体的微流控芯片癌症液体活检体外诊断系统奠定基础。