恶性肿瘤是一种严重危害人民健康和生命的疾病，恶性胸腔积液为癌症病人较常见的并发症。临床上，传统的诊断方法对恶性胸腔积液的诊断和对非恶性积液的鉴别诊断有时仍然非常困难。在一些肿瘤标志物中，癌胚抗原被研究得最广泛，敏感性也最高，被认为是一个较好的指标。端粒酶(telomerase)是近年来发现的与肿瘤发生发展密切相关的一种逆转录酶，已成为肿瘤研究的热点。近年来，应用流式细胞仪(Flow Cytometry，FCM)测量术对人体恶性肿瘤DNA异倍体(DNA aneuploidy)的研究表明，DNA异倍体能反映恶性肿瘤的生物学特征，对于诊断恶性肿瘤具有良好的临床意义。 本研究采用端粒酶重复放大程序(Telomerase Repeat Amplification Protocol，TRAP)检测了53例患者胸腔积液端粒酶活性、DNA倍体分析，及癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen CEA)，探讨端粒酶活性、DNA倍体分析、CEA以及三者联合检测在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的价值，为临床提供依据。 对象与方法 一、对象 所有患者均来自浙江大学医学院附属邵逸夫医院 1999年 11月至2000年 11月期间住院病人，胸腔积液患者 53例，所有病人均进行诊断性胸腔穿刺检查，胸水送常规、生化、乳酸脱氢酶几DH人 病理脱落细胞学检查、CEA、端粒酶及DNA倍体分析。部分患者接受纤维支气管镜检查、经皮胸膜活检以及淋巴结活检。根据最终诊断结果，病人分为3组。组1为恶性胸腔积液组，共16例，其中男8例，女8例，年龄58．l士16．6岁，最大sl岁，最小28岁。组2为可疑恶性胸腔积液组，共18例，其中男13例，女5例，年龄64．2士15．9岁，最大82岁，最小32岁。组3为非恶性胸腔积液组，即对照组，其中男12例，女7例，年龄55．0士15．6岁。 二、方法2．1胸水标本的获得 对所有胸腔积液患者行胸腔穿刺检查。2．2 端粒酶活性检测：胸腔穿刺后取胸水20ml置于肝素抗凝管中，采用TRAP PCR－ELISAIL进行定性及定量检坝。2．3 DNA倍体分析：胸腔穿刺后取胸水100ml置于肝素抗凝管中，采用流式细胞仪测定DNA含量，测定数据和图形以参数组方图显 ’J。。2．4 CEA测定：胸腔穿刺液CEA测定采用美国 ABBOTT 公司的 CEA敞颗粒酶免疫测定NEIA）试剂盒，在AXSWh全自动化学发光分析仪上狈定CEA含量。三、统计学处理 所有实验数据均经SPSS FOR WINDOWS 10．0软件包处理。运用受试运算特性曲线（Receiver operating Characterlst。cCurve，ROC曲线）分析来判断CEA定量分析、DNA指数、端粒酶定量分析和S期分数对诊断胸腔积液是否为恶性中所起作用的优劣程度。定性指标DNA倍体与端粒酶定性分析采用比数比方法来估计其在恶性胸腔积液中的诊断作用。组间差异显著性检验采用多个独立样本的非参数t检验。以W0．05为有统计学意义。 结果与讨论 本研究胸水病理组织和细胞学检查诊断率为47．1丸可能与脱落细胞检查会受到如标本收集、检查人员辨认水平、复查次数、肿瘤病程等多因素的影响有关。 端粒酶检测敏感性为73．5兄 特异性为94．7兄 阳性预测值为0．96，阴性预测值为0．82，总准确性为85．7儿DNA倍体分祈敏感性为55．9儿 特异性为8牛2儿 阳性预测值为0．80，阴性预测值为0．727，总准确性为74．3丸CEA检测敏感忖为7｝5讯特异性84．2讯川胜顶坝值为O巴＊ 门川忙NwhJ人＜刃H】一 一O准帅什乃u回9儿二二井联合敏感 性＊％，特异性68。仰。TR八P吐士 粒酶活 件炊丁、CEA微 颗粒酶免疫测定以及DNA倍体分析在恶性胸腔积液中单项检出率均 高于细胞学检查，它们与病理的高符合率以及在非恶性胸腔积液中 的低阳性率说明是这些均为诊断恶性积液的可靠的方法。其联合检 测，特别是端粒酶与 CEA联合，能提高敏感性达 100％，而特异性 仅略有降低。 恶性积液组与非恶性胸腔积液组、可疑恶性积液组与非恶性胸 腔积液组端粒酶定量、DNA倍体分析、CEA检测经多个独立样本的 非参数t检验，差异有显著性。 对恶性积液组四项定量指标对恶性积液的诊断价值大小分别为：CBA定量＞端粒酶定量＞S期分数e ONA指数。在可疑恶性胸腔积液中，端粒酶对恶性积液的诊断价值略高于CEA及DNA倍体分祈，说明在胸水的鉴别诊断中，对于可疑恶性胸腔积液，甚至对于无原发肿瘤而病理细胞学或影像学不明确的胸腔积液，端粒酶活性检测应作为首选，最好再联合CEA检测。 明确恶性胸水组与可疑恶性积液组合并后诊断价值大小分别为：CEA定量＞端粒酶定量 o S期分数 o DNA指数。 通过估计比数比m Ratios，OR）的方法来评定两个定性指标DNA倍和端粒酶定性分析在诊断恶性胸腔积液、可疑胸腔积液中 白作尽 一岗＊酶较洲A” 体分析OR值人，危险性厂＊片灶 丸。 4 结 论 1．端粒酶活性与CEA的检测对良恶性胸腔积液的鉴别是非