【摘 要】
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目的本实验建立在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型基础上,研究NF-κB和TLR4在无创性远端肢体缺血后处理脑保护机制中的作用。方法健康雄性SD大鼠,体重250-300g,随机分为3组(e
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目的本实验建立在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型基础上,研究NF-κB和TLR4在无创性远端肢体缺血后处理脑保护机制中的作用。方法健康雄性SD大鼠,体重250-300g,随机分为3组(each n=15):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)和无创远端缺血后处理组(NRIPoC组)。I/R组参照Longa制作MCAO模型方法制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型,阻断大鼠右侧大脑中动脉90min后施行再灌注。Sham组除不插入栓线外,其他手术操作步骤同I/R组。NRIPoC组建立局灶性脑缺血再灌注损伤模型方法同I/R组,在大脑中动脉再灌注后立即行右侧下肢加压缺血5min/再灌注5min共3次循环后持续恢复右下肢血流。I/R组和NRIPoC组于大脑中动脉再灌注后24h, Sham组于手术完成后24h分别对各组大鼠进行神经功能障碍评分,评分后处死大鼠,进行TTC染色测定脑梗死容积；HE染色观察缺血半影区脑组织细胞形态及神经细胞存活情况。免疫组化和Western blot法测定NF-κB、TLR4的表达。结果1.大鼠脑缺血再灌注24h后, NRIPoC组脑梗死容积比I/R组脑梗死容积显著减小(P<0.05)。2.HE染色显示I/R组和NRIPoC组脑缺血中心区均出现细胞坏死,脑缺血半影区神经细胞数目减少,体积减小,核固缩,染色质浓缩、边聚。而NRIPoC组细胞损伤程度较I/R组减轻。3.缺血半影区NF-κB和TLR4表达：与Sham组相比,I/R组和NRIPoC组缺血半影区NF-κB和TLR4表达免疫组化法及Western blot法均显著升高(P<0.05),但NRIPoC组NF-κB和TLR4表达较I/R组表达降低(P<0.05)。4.脑缺血再灌注24h后,NRIPoC组神经功能障碍评分中位数较I/R组下降,但I/R组和NRIPoC组神经功能障碍评分差异无统计学意义(P>0.05)。结论无创性远端肢体缺血后处理的脑保护机制可能与NF-κB和TLR4表达降低,脑内炎症反应减轻有关。
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