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目的：研究人羊膜上皮细胞体外培养和扩增，及其向角膜上皮细胞诱导分化的可能性。 方法：取足月顺产人胎盘，钝性剥离羊膜，PBS反复冲洗，经0.05％胰蛋白酶+0.02％EDTA消化后，获取的羊膜上皮细胞用锥虫蓝染色判断其活性，以1×108·L-1细胞密度接种于T25培养瓶中，应用DMEM/F12培养基(10％胎牛血清，人重组表皮生长因子10ng/ml，青链霉素50IU/ml)进行原代和传代培养，并通过免疫组化方法测定细胞角蛋白3、18、19的表达情况，对人羊膜上皮细胞进行鉴定。取新西兰大白兔角膜，应用全角膜组织块培养法培养角膜上细胞，取原代角膜上皮细胞和第2、3代人羊膜上皮细胞共同接种于transwell小室内进行培养，人羊膜上皮细胞置于transwell小室的下层，小室放于37℃、饱和湿度、5％CO2孵箱内培养7天。观察人羊膜上皮细胞形态变化，通过流式细胞仪检测诱导前、诱导后细胞角蛋白3的阳性表达率，并通过扫描电镜观察诱导前、后细胞形态及结构的变化。 结果：人羊膜上皮细胞在原代培养2 h后开始贴壁生长，3d后贴壁紧密，难以消化下来。细胞呈多角形、不规则形，排列呈铺路石样表现。体外可连续传4～5代，6代后部分细胞体积开始变大，部分呈纤维细胞样改变。细胞角蛋白3、18、19多克隆抗体染色阳性。流式细胞仪检测CK3、CK18、CK19表达率分别为41.84±3％，46.51±2％，和33.41±3％。兔角膜上皮细胞在培养的第3天时开始爬出，呈多角形，排列均匀。经诱导培养后的人羊膜上皮细胞呈多角形、扁平状，细胞体积增大。流式细胞学检测细胞角蛋白3表达率为75.70±0_3％，经统计学处理，有统计学意义。扫描电镜显示诱导前人羊膜上皮细胞大小形态不一，有长梭形、多角形、扁圆形等不同形态。直径约为60μm，细胞较丰满，表面可见大量微绒毛，细胞可见长的突起或伪足，细胞之间连接多。诱导后羊膜上皮细胞大小、形态较均一，呈扁平、多角形。细胞直径约为100μ m，细胞之间联系少，细胞薄、扁平状，胞质少，细胞质内呈网状。细胞表面微绒毛不明显，未见伪足。 结论：人羊膜上皮细胞能够在体外进行原代、传代培养，并维持增殖能力。为培养羊膜上皮细胞提供了新的、简便的培养方法。人羊膜上皮细胞可被角膜上皮细胞诱导分化为角膜上皮细胞。建立了安全、有效的人羊膜上皮细胞向角膜上皮细胞诱导分化方案。