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噬菌体是一类感染原核生物的病毒,在自然界中广泛分布,种类繁多。近年来,由于养殖业多采用高密度培养以及抗生素的滥用,导致大量耐药菌株出现,噬菌体作为一种更有效的治疗手段,正越来越受到关注。本文运用直接法在厦门港、演武大桥桥头排污口、厦门大学南大沟、芙蓉湖、珍珠湾等处进行采样,经菌悬液富集后,以双层琼脂平板法和液体纯化法分离纯化出2株大肠杆菌裂解性噬菌体EX01、EX02,进行宿主感染试验,测定了EX01低温保存的效价和一步繁殖曲线,并使用EX01分别处理生活污水,预处理养殖用水,处理养殖中期用水和青蟹暂养海水。其结果将为海水养殖病害防治提供资料,具有重要理论意义和应用价值。主要结果如下:1、以大肠杆菌为宿主,从自然水体中分离得到2株大肠杆菌裂解性噬菌体EX01和EX02。经电镜观测,EX01为蝌蚪状具可收缩尾的噬菌体,其头部为三十面体,约70×110nm,尾部长约100~130nm,尾宽约18~22nm,有尾鞘、基板、尾丁、尾丝等结构,隶属肌尾病毒科(Myoviridae). EX02为短尾噬菌体,其头部为二十面体,大小为20nm,尾部长约2-3nm,隶属短尾病毒科(Podoviridae)。2、使用噬菌体EX01和EX02对5株不同细菌进行宿主感染试验,结果显示EX01能感染工程菌E. coli DH5a和另外2株分离自生活污水的大肠杆菌(E.coli S1和E. coli S2),是一株广谱噬菌体;EX02仅能感染E. coli S20EX01和EX02均无法感染弧菌W(Vibrio sp.)和恶臭假单胞菌(Pseudomonas puticd)。3、针对噬菌体EX01进行低温保存的效价试验,噬菌体以悬液形式分装-18℃保存,每7d测定一次,直至检测不到噬菌体。结果显示悬液低温保存法能保存噬菌体30d以上,保存的56d内EX01仍然具有感染性。4、测定噬菌体EX01感染大肠杆菌E.coli S1的一步繁殖曲线,结果表明,EX01的潜伏期在25min左右,裂解期为25~35min。在15min内吸附率为85.6%,裂解完成后平均裂解量为135.05。5、利用效价为1.81X108pfu·mL-1的噬菌体EX01处理生活污水1h,结果显示总菌数减少34.6%,大肠杆菌数减少89.0%。6、利用噬菌体EX01预处理新鲜未使用的养殖海水,处理前后均未检出细菌,表明该海水经过过滤预处理,含菌量极低,适合进行养殖活动。7、利用效价为1.47X108pfu·mL-1的噬菌体EX01处理采自牡蛎育苗缸的养殖中期用水1h,结果显示总菌数减少了13.3%,大肠杆菌数减少82.4%。8、利用效价为1.04×108pfu·mL-1的噬菌体EX01处理青蟹暂养海水1h,结果显示总菌数增加7.7%左右,大肠杆菌数减少98.3%。9、将噬菌体EX01的效价设置为7.02x102pfu·mL-1,7.02x103pfu·mL-1,…,7.02x106pfu·mL-1.分别处理青蟹暂养海水,取样时间为1h、2h、3h。结果显示在同一效价条件下,总菌数随着处理时长的增加而增加,大肠杆菌数随着处理时长增加呈下降趋势,且在降低98~99%后维持稳定。在同一时长条件下,总菌数随着噬菌体效价增加先减小后增加,最小值对应的效价为7.02x103pfu·mL-1,大肠杆菌数随着噬菌体效价增加呈下降趋势,且在降低98~99%后维持稳定。以上结果表明,EX01能有效降低水环境中大肠杆菌浓度,具有应用于水产养殖的潜力。