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钾离子通道是种类最多、分布最广的一类离子通道,在可兴奋细胞、非可兴奋细胞的信号转导过程中起着极其重要的作用,参与细胞的增殖和分化等过程。Kv1.5钾通道(又称为KCNA5)是由KCNA5基因编码的蛋白,属于电压依赖型钾离子通道。自1990年首次从鼠脑内克隆成功后,人们陆续发现它广泛表达在脑、心脏、肝脏、肾等组织和器官以及多种肿瘤细胞中。研究表明,Kv1.5钾通道与乳腺癌的发生、发展有着密切的关系。因此,研究Kv1.5在乳腺细胞增殖中的作用及机制,进一步探讨Kv钾通道作为乳腺癌治疗的靶标,对临床预防和治疗乳腺癌具有重要的意义。研究表明,许多类型的细胞的Kv1.5钾通道与胞膜窖或窖蛋白-1(Caveolin-1,Cav-1)存在紧密联系。本室前期工作表明,人乳腺上皮细胞MCF10A中Kv1.5与Cav-1蛋白含量均显著多于人乳腺癌细胞MCF-7,这提示我们,Kvl.5钾通道可能与Cav-1相互联系,影响乳腺细胞增殖。本文利用RNAi技术建立Kv1.5基因敲低的稳定传代细胞模型MCF10AKv1.5(-),采用细胞计数法、免疫印迹、免疫荧光等方法研究Kv1.5在乳腺细胞信号转导和增殖过程中的作用及Kv1.5与Cav-1的相互作用关系,旨在探讨Cav-1与Kv1.5相互作用调节增殖相关信号通路控制乳腺上皮细胞增殖的机制。结果：(1)利用RNAi技术建立了Kv1.5基因敲低的人乳腺上皮细胞模型MCF10AKv1.5(-),发现Kv1.5基因敲低后,细胞倍增时间延长,PCNA蛋白表达明显下调,细胞增殖受到抑制。(2)利用免疫印迹杂交技术研究Kv1.5基因敲低对MAPK和Akt通路激活的影响,发现Kv1.5基因敲低显著抑制MCF10A细胞内Akt信号通路的激活,促进MAPK与Akt信号通路的交叉对话。(3)利用Kv1.5基因敲低的细胞模型MCF10AKv1.5(-)和Cav-1基因敲低的细胞模型MCF10ACE研究Kv1.5与Cav-1之间的相互作用,发现MCF10A细胞内Cav-1与Kv1.5相互作用共同分布于胞膜窖,Cav-1基因敲低抑制Kv1.5在膜上的表达和分布。结论：Kv1.5基因敲低抑制人乳腺上皮细胞MCF10A增殖,并通过与Cav-1相互作用抑制Akt信号通路的激活。