结肠癌是人类高发恶性肿瘤之一，近年来其发病率一直呈上升趋势，在全球恶性肿瘤发病率中已上升至第三位，其死亡率居恶性肿瘤死因的第二位。在我国，结直肠癌死亡率已位于恶性肿瘤死亡率的第五位，严重危害人类健康。在结肠癌的发展过程中，常常涉及到多种蛋白质表达的改变，可作为结肠癌发生、发展及预后的肿瘤标志物。已有研究发现，人类蛋白酶体激活因子亚基2（PSME2或PA28β）可导致细胞增殖和恶性程度的变化，其表达下降与胃腺癌的发生发展有关。同时有研究表明，PSME2基因在肝癌、乳腺癌和肾癌组织中的表达发生改变，也有报道PSME2在结肠癌中低表达。本试验以PSME2基因为切入点，探讨其RNA干扰及高表达对结肠癌增殖的影响，为肿瘤的免疫疗法奠定基础。本试验通过基因克隆，原核表达，构建RNA干扰及高表达载体，对细胞进行转染。应用Real-time PCR检测结肠癌HCT-8细胞PSME2基因的mRNA表达水平；Western-blotting检测结肠癌HCT-8细胞PSME2基因的转录水平；MTT检测RNA干扰及高表达对结肠癌HCT-8细胞增殖的影响；动物实验检测RNA干扰及高表达对结肠癌HCT-8肿瘤增殖的影响。Real-time PCR结果显示，转染RNA干扰质粒组（U6/GFP/Neo-PSME2-homo-1、U6/GFP/Neo-PSME2-homo-2、U6/GFP/Neo-PSME2-homo-3、U6/GFP/Neo-PSME2-homo-4）结肠癌HCT-8细胞PSME2基因的mRNA表达水平下降(2^－ΔΔCT<0.5)，而转染高表达质粒组（pEGFP-C1-PSME2）mRNA表达水平上升(2^－ΔΔCT>2)，转染阴性对照质粒组（pEGFP-C1、U6/GFP/Neo-shNC、U6/GFP/Neo-shhGAPDH）mRNA表达水平与空白对照组差异不明显(2^－ΔΔCT>0.5)。Western-blotting结果显示，4组转染RNA干扰质粒组结肠癌HCT-8细胞PSME2基因翻译的PA28β表达量下降，转染高表达质粒组的PA28β表达量上升，阴性对照组与空白对照组差异不明显。同时利用MTT法对各组细胞增殖情况进行研究，结果发现，RNA干扰组的细胞增殖明显快于空白对照组（P<0.05），高表达质粒组的细胞增殖缓慢（P<0.05），阴性对照组与空白对照组差异不显著。通过动物试验，成功建立结肠癌HCT-8细胞裸鼠肿瘤移植模型。治疗试验结果显示，PSME2基因的高表达明显使HCT-8细胞裸鼠移植肿瘤缩小（P<0.05），其抑制率为56.77%，而PSME2基因RNA干扰组的HCT-8细胞裸鼠移植肿瘤增长速度明显比空白对照组快。