积雪草多糖的分离纯化、化学结构、生物活性构效关系及葡聚糖和半乳聚糖的化学修饰研究

来源 :中国科学院上海生命科学院上海药物研究所 中国科学院上海药物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yixiangren1976
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积雪草为于伞形科(Umbelliferae)积雪草属(Centella)植物的全草.中国所产积雪草均为同一种,广泛分布于华南、华中、华东、中南和西南各地,多生长在海拔2000m的阴湿地区.积雪草为中国药典收载的常用中药,具有清热利湿、解毒消肿的功效,适用于湿热黄疸、中暑腹泻、砂淋血淋、痈肿疮毒等,临床上多用于治疗跌打损伤、皮肤病等.积雪草属植物的化学成份包括多种α-香树脂醇型的三萜,及其内消旋肌醇、积雪草糖、蜡、胡萝卜烃类、叶绿素以及山奈酚、槲皮素和葡萄糖、鼠李糖的黄酮甙等成份.但对其中多糖类组分的研究迄今尚未见报道.为了研究其中多糖的化学结构和生物活性,我们对积雪草中的多糖进行了提取、分离、纯化、结构鉴定和生物活性的测定.积雪草全草经粉碎后,分别用水和氢氧化钠碱溶液提取,得到水提粗多糖和碱提粗多糖,然后通过DEAE-纤维素柱层析和凝胶渗透色谱进行反复分离、纯化.最后,从积雪草中分得9种首次获得的均一多糖组分.各多糖组分经过各种化学方法(糖组成分析、甲基化分析、部分酸水解、高碘酸钠氧化、乙酰解和锂降解等)和生物方法(酶解)及光谱方法(<1>H NMR、<13>C NMR、2D NMR、ESI-MS、IR等)进行结构特征的研究.药理研究表明水提多糖组分及其分离获得的HBN、S1A2-1、S3U-1具有明显的免疫调节活性,其中HBN在体内、体外均具有显著的免疫调节活性.在小鼠体内研究中,HBN增大脾指数,但对胸腺作用有限,浓度为10 mg/kg时,HBN抑制IgG.积雪草水提粗多糖及其各级多糖组分均具有一定的降血糖活性,最后纯化得到的组分S5X,具有明显的降血糖活性和免疫活性.在研究各多糖组分的免疫活性的同时,对其构效关系进行的了探讨.根据试验结果发现果胶多糖S3A中1,6-连接的半乳聚糖链对其免疫活性起着最主要的影响,同时分子中的其它一些结构区域也有一定的活性影响.论文中并对乙酰基对果胶的免疫活性进行了探讨.该文还对已知结构的α-1,3-葡聚糖、β-1,3-葡聚糖和β-1,3-半乳聚糖进行衍生化研究.衍生化反应包括硫酸化、磷酸化、羧甲基化、羧甲基-苄基偶合及选择性硫酸化等.对这些衍生物进行物理化学性质的测定、免疫活性的测试,并探讨了构效关系.
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