【摘 要】
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目的:研究云芝糖肽(PSP)对乳腺癌患者外周血单个核细胞(PBMC)的Toll样受体4(TLR4)的作用,以及PSP对PBMC中TLR信号通路MyD88途径的免疫调节作用。方法:于体外分离乳腺癌患者或健
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目的:研究云芝糖肽(PSP)对乳腺癌患者外周血单个核细胞(PBMC)的Toll样受体4(TLR4)的作用,以及PSP对PBMC中TLR信号通路MyD88途径的免疫调节作用。方法:于体外分离乳腺癌患者或健康人的PBMC,并将其分为PSP组和对照组,采用TLR4单克隆抗体对各组进行免疫荧光染色。将乳腺癌患者PBMC分为阴性空白对照组、TLR4抗体组、PSP组和PSP+TLR4抗体组,应用实时荧光定量PCR (Q-PCR)检测各组PBMC IL-12、IL-6和TNF-α表达的水平。采用Q-PCR定量检测PSP处理后TLR通路MyD88途径相关基因的表达情况,同时使用Western blot检测信号末端蛋白的表达情况。结果:TLR4受体研究中,健康人PBMC对照组细胞荧光强度较强,而PSP组细胞的荧光强度较弱。乳腺癌患者PBMC,PSP组与对照组相比,细胞荧光强度更弱。与阴性空白对照组比较,TLR4抗体组除IL-6外,均显著降低,PSP组各基因的表达水平显著上调,且差异均有统计学意义(p <0.05);与PSP+TLR4抗体组比较,TLR4抗体组和PSP组各基因都明显下调,且差异具有统计学意义(p <0.05)。PSP能够显著提高TLR信号通路中TLR4、TLR5、TLR6、IRAK4、TRAF6、IRF5、TAK1、IKKα、NF-κB、ERK、P38、JNK、AP-1基因的相对表达量(P<0.01),信号末端蛋白NF-κB、AP-1和IRF5均有上调。结论:TLR4可能是PSP的作用受体之一,PSP对乳腺癌患者PBMC中TLR通路的调控可能主要是通过MyD88途径促使终端效应因子的释放从而发挥其免疫调节作用。
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