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目的 针对凋亡抑制因子survivin应用RNA干扰技术(RNAi)抑制云南个旧肺鳞癌细胞YTMLC细胞株和Hela细胞株内源survivin基因的表达进而促进YTMLC细胞和Hela细胞凋亡。 方法 构建重组质粒pshRNA-survivin-1和pshRNA-survivin-2并分别转染YTMLC细胞株和Hela细胞株，通过免疫荧光和Western blot检测survivin蛋白表达及通过半定量RT-PCR检测survivin mRNA转录水平的变化，利用MTT法检测YTMLC细胞和Hela细胞的增殖活性，并通过流式细胞仪使用PI-Annexin V双染法检测YTMLC细胞和Hela细胞的凋亡情况。 结果 构建的2种重组质粒pshRNA-survivin-1和pshRNA-survivin-2均能明显抑制survivin基因的表达；应用免疫荧光检测YTMLC细胞和Hela细胞中survivin基因的表达，转染重组质粒pshRNA-survivin-1和pshRNA-survivin-2的实验组survivin荧光强度均明显低于转染空载体pGE-1和非特异对照质粒pshRNA-negative的对照组荧光强度；应用Western blot检测YTMLC细胞和Hela细胞中survivin蛋白表达，转染重组质粒pshRNA-survivin-1和pshRNA-survivin-2的实验组survivin蛋白表达均明显低于转染空载体pGE-1和非特异对照质粒pshRNA-negative的对照组的表达；通过半定量RT-PCR检测到YTMLC细胞中survivin基因mRNA转录明显减少，抑制率为80.60％和70.09％；通过半定量RT-PCR检测到Hela细胞中survivin基因mRNA转录明显减少，抑制率为87.05％和81.04％；MTT法检测结果显示转染2种重组质粒pshRNA-survivin-1和pshRNA-survivin-2的YTMLC细胞和Hela细胞的增殖活性均明显下降；通过PI-Annexin V双染法检测YTMLC细胞的凋亡分别达33.42±2.42％(P＜0.01)和20.09±1.32％(P＜0.01)；通过PI-Annexin V双染法检测Hela细胞的凋亡分别达36.02±2.12％(P＜0.01)和35.29±2.02％(P＜0.01)。 结论 重组质粒pshRNA-survivin-1和pshRNA-survivin-2均可明显抑制YTMLC细胞和Hela细胞内源survivin的表达和mRNA的转录并均可明显促进YTMLC细胞和Hela细胞的凋亡和增殖活性明显下降，为survivin介导的肿瘤基因沉寂疗法提供良好的实验基础，特别是为云南肺癌的基因治疗带来了新思路。